セトリミド寒天またはセトリミドは、緑膿菌の単離のために設計された選択固体培地です。これは、この種の特徴的な色素の生成を示すことに基づいており、King、Ward、Raneyによって作成されたTech寒天を改変して作られました。
元の処方には、塩化マグネシウム、硫酸カリウム、ゼラチンの膵臓消化、および寒天が含まれていました。式の変更は、セトリミド（臭化セチルトリメチルアンモニウム）とグリセロールの添加から成っていました。
緑膿菌を播種したセトリミド寒天出典：Wikimedia CommonsのBiotechMichael
セトリミド寒天は、緑膿菌の存在が疑われるサンプルの微生物学的研究に役立ちます。この細菌は通常の環境微生物叢の一部ですが、日和見病原体として頻繁に機能するため、この細菌は非常に重要です。
このため、この細菌によって引き起こされる最も一般的な問題の1つは、院内感染です。つまり、病院環境内で発生し、免疫システムが低下している患者を攻撃します。
一方、この微生物は湿度との親和性のため、最も脆弱な汚染ターゲットは、呼吸補助装置、医薬品、ネブライザー、水源、エアコン、消毒剤、石鹸溶液、注射液、開放創です。 、カテーテル、尿管など。
この意味で、セトリミド寒天は、前述の要素に対する微生物学的制御および培養を行うのに有用です。
基礎
セトリミド寒天は、緑膿菌の増殖を促進し、その色素の産生を刺激し、次に他の微生物の増殖を阻害する培地の能力に基づいています。
これらのプロパティは、各コンポーネントの機能によるものです。存在するゼラチンペプトンは、窒素、ビタミン、ミネラルの供給源として機能します。グリセロールまたはグリセリンは炭素源として機能します。
その一部として、セトリミド（臭化セチルトリメチルアンモニウム）は、同じ属に属する他の種を含む、緑膿菌以外の細菌の増殖を阻害する物質です。
阻害は、セトラミドがカチオン性洗剤として作用し、P。aeruginosaと他のいくつかの細菌が生き残ることができることを除いて、ほとんどの細菌の原形質膜を不安定化させるために発生します。
一方、塩化マグネシウムと硫酸カリウムが含まれています。これらの化合物は、緑膿菌がピオシアニン、ピオベルジン、ピオルルビン、ピオメラニン、フルオレセインなどのさまざまな色素を産生する能力に関連する表現型の発現を刺激します。最後に、それはしっかりとした一貫性を与える寒天を含んでいます。
解釈
この寒天で得られた成長の解釈は次のように行われます：
青緑色、緑色、茶色、または赤みを帯びた色素の生成と、フルーティーな匂い（アミノアセトフェノン）の放出を伴う、規則的なエッジを備えた丸い滑らかなコロニーの観察は、上記のサンプルにおけるこの細菌の存在の推定結果です。
一方、コロニーに明るい緑がかった黄色の色素が観察されたことは、プレートが紫外線にさらされたときに緑膿菌を示しています。
紫外光下でのセトリミド寒天上の緑膿菌コロニーの蛍光。
観察された各色は特定の色素の生成によるものであることに注意してください。青緑色の色素はピオシアニン、緑はピオベルジン、赤みはピオルビン、茶色はピオメラニン、UV光下の明るい黄緑色の蛍光はフルオレセインに対応します。
準備
脱水した培地43 gを量り取り、蒸留水に溶解します。グリセロール10 mlを追加します。混合物を熱源に持って行きます。完全に溶解するまで数分間沸騰させます。
121°Cで15分間オートクレーブします。温度が約50°Cになったら、立てて滅菌ペトリ皿に入れます。
固化させ、反転させ、プラケロで注文し、使用するまで冷蔵庫に保管します。セトリミド寒天プレートは、播種する前に冷蔵庫から取り出し、室温に戻す必要があります。
培地の最終pHは7.2±0.2です。
脱水後の培地の色はベージュで、製剤は不透明な白色です。
用途
緑膿菌の存在が疑われるあらゆる種類のサンプルをセトリミド寒天に播種することができます。したがって、微生物学のすべての領域（環境、産業、臨床、水、食品）で役立ちます。
この微生物は、患者が使用する汚染された機器、医薬品、溶液、消耗品を通じて患者に到達するため、病院環境を分析し、それにより是正措置を適用できることが非常に重要です。
このようにして、微生物は免疫抑制された患者の下気道、尿路および創傷に感染する可能性があります。
緑膿菌のコロニー数は、微生物限界試験でも行うことができます。
播種
セトリミド寒天は初代培養に使用できます。プレートは、その端の1つに接種され、そこから枯渇して残りのプレートに分配されます。液体サンプルは、ドリガルスキーヘラで表面に播種できます。
プレートを好気的に37°Cで24時間インキュベートします。
制限事項
-Pseudomonas aeruginosas株の一部はピオシアニンを産生しないため、偽陰性と解釈できます。
-この培地では、臨床的に重要ないくつかのシュードモナス種が抑制されています。
-Pseudomonas aeruginosaについて説明されている特性を観察しているにもかかわらず、それらは追加の識別テストで確認する必要があります。見逃してはならない検査はオキシダーゼ検査であり、陽性でなければならない。
-いくつかの腸内細菌科はこの培地で成長し、黄色の色素を発生させることができますが、プレートが紫外光に曝されると蛍光がないという点で緑膿菌とは異なります。
-Serratia marcescensはなんとかピンク色の色素を開発、生産しています。
-セトリミド寒天を播種したプレートを室温でしばらく曝露すると、P。aeruginosa株は紫外光下で観察される蛍光を失う可能性がありますが、37°Cで再度インキュベートすると特性が回復します。
QA
セトリミド寒天の良好な性能を分析するには、Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027、Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637、Escherichia coli ATCC 25922およびStaphylococcus aureus ATCC 25923などのコントロール株を使用できます。
期待される結果は次のとおりです。
- 青緑色の色素と陽性のフルオレセインで、緑膿菌の良好な成長。
- S. maltophiliaおよびS. aureusは部分的または完全に阻害されます。
- 大腸菌は完全に阻害されると予想されます。
参考文献
- CallicóA、CedréB、Sifontes S、Torres V、Pino Y、CallísA、Esnard S. Pseudomonas aeruginosaの臨床分離株の表現型および血清学的特徴。VacciMonitor。2004; 13（3）：1-9。
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