栄養寒天を非選択培地及び無差動固体培養です。栄養学的な観点から要求のないあらゆる種類のバクテリアがこの培地で育ちます。
これは単純な培地であり、その名前にもかかわらず、Brain Heart Infusion AgarやTrypticase Soy Agarなどの他の類似の培地と比較して栄養価が低くなっています。
栄養寒天のコロニー数
実験室でのその有用性は非常に多様です。主に、種の継代培養、菌株の維持、コロニーのカウント、血液寒天の調製の基礎として使用されます。
同様に、その明るいベージュ色のため、いくつかの細菌株によって生成された色素の生成は、Pseudomonas aeruginosaの緑がかった色素、Serratia marcescensが室温で生成した赤レンガ色の色素、ブドウ球菌の黄金色の色素など、非常に区別できます。とりわけ、黄色ブドウ球菌。
また、市場で最も安価に成長しているメディアの1つです。
基礎
すでに上で述べたように、それは、制限なしに、そして解釈する複雑な反応なしに、細菌の増殖のための栄養素を提供することに依存する非常に単純な培地です。
培地が半透明なので、デプスシード法でコロニーを数えるのに最適です。
組成
それは主に肉エキスまたは酵母エキス、ペプトンまたはゼラチン膵臓消化物、寒天、塩化ナトリウム、蒸留水で構成されています。
肉または酵母エキスとペプトンは、炭素とミネラル（窒素、リン、硫黄）の重要な供給源であり、細菌がエネルギーと成長因子の供給源として使用します。
同様に、寒天はすべての固体培養培地のベースであり、ゼラチンに置き換わる。これは、Robert Kochが培地に固体の一貫性を与えるために使用した最初の基本化合物であった。
寒天は、ガラクトース、ガラクトマンナン、アガロース、アガロペクチンから構成される多糖類です。それは40°Cに設定され、100°C近くで溶融します。
その一部として、塩化ナトリウムは培地に細菌の発生に必要な浸透圧を提供します。
最後に、水は凍結乾燥した化合物を水和および溶解する働きをします。中性pHに調整した蒸留水を使用してください。水道水は、培地のリン酸塩と反応して不溶性の塩を形成する可能性のあるカルシウムとマグネシウムを含んでいるため、使用しないでください。
準備
栄養寒天1リットルの場合、脱水培地31 gの重さを量る必要があります。フラスコに入れ、1リットルの蒸留水に溶かします。5分間放置した後、熱源で加熱し、1〜2分間沸騰するまで常に混合します。
培地の調製。
次に、フラスコをオートクレーブに入れ、121℃で20分間滅菌します。
オートクレーブでの滅菌
その後、オートクレーブから取り出され、層流フードまたはブンゼンバーナーを使用して滅菌ペトリ皿に入れられます。
ペトリ皿が使い捨て（プラスチック）の場合、寒天の温度が約50°Cのときに培地を分配して、過度の熱によって変形しないようにする必要があります。
固化し、逆さまのプレートホルダーに保管し、使用するまで2〜8℃で冷蔵します。
プレートはシードする前に焼き戻しする必要があります。栄養寒天プレートが汚染または脱水されている場合は使用しないでください。
調製した培地のpHは7.3±0.2に調整する必要があります。
用途
これは微生物学研究室で使用される最も単純な培地です。その処方は、非要求性細菌の増殖に優れています。
主な用途は次のとおりです。
血液寒天の準備の基礎として
この培地は、血液寒天培地を調製するためのベースとして使用される場合がありますが、最も一般的に使用されるベースではありません。
胞子形成菌の胞子形成を刺激する
この培地は、バチルス種のような胞子形成細菌の胞子形成を刺激するために特に有用です。
このために、バチルス属の株が播種され、好気性生物において37℃で24時間インキュベートされます。コロニーが成長したら、プレートに温度ストレスをかけます。つまり、オーブンの温度を44°Cに上げ、さらに24時間放置するか、冷蔵庫に24時間置きます。
時間の終わりに、文化の塗抹標本が作られ、グラム染色またはシェファー・フルトン胞子染色で染色されます。それらの中で、内生胞子（桿菌の内側の胞子）と外胞子（桿菌の外側の胞子）を持つ桿菌が観察されます。
ひずみメンテナンス
一部の研究所または大学の教育支援研究所は、研究または教育実践の準備のためにバクテリアバンク（バクテリオテカ）を使用するために、可能な限り臨床的に重要な生菌を維持する必要があります。学生はこれらの微生物を操作し、識別することを学びます。
栄養寒天は、脳の心臓注入寒天と同様に、この目的に使用できます。寒天を準備し、ベークライトの蓋が付いたチューブに注ぎ、底に傾けて、底にブロックを形成し、表面にベベル（フルートビーク）を形成します。
各チューブには、播種する細菌の名前と日付が表示されています。各細菌をベベルに播種し、24時間インキュベートし、コロニーが成長したら、チューブを室温で保管します。
バクテリオテカは、培地の汚染と脱水、さらには細菌の死を避けるために、1〜3か月間更新する必要があります。
この方法で維持できるのは、非ピック菌のみです。
コロニー数
標準的なカウント寒天など、コロニーをカウントするための特別な方法がありますが、栄養寒天は、ドリガルスキーヘラで表面播種するか、深さによって、この目的に使用できます。このため、食品や水の微生物分析に非常に役立ちます。
診断テストの実行
これは血液やその他の添加物を含まない培地であるため、この培地で増殖したコロニーを採取してカタラーゼ試験を行うのに最適です。
同様に、その明るい色のために、干渉されずに播種された寒天の領域で直接オキシダーゼテストを実行することが示されています。
レクリエーション用塩水（ビーチ）からの中温性好気性菌の回収
10％海水で調製された栄養寒天は、海水の中温性好気性菌の評価に役立ちます。
このタイプのサンプルでは、従来の方法で調製された培地を使用すると結果が重複するため、このようにして、水がこれらの微生物で持っている実際の汚染レベルを評価できます。
これは、Cortezらによって実証されました。2013年に研究活動に参加しました。
これは、細菌が高塩濃度環境から低塩濃度環境に移行するときに急激に変化するために説明できます。したがって、微生物は無菌状態になり、生存可能ですが、培養はできません。
参考文献
- 「栄養寒天」ウィキペディア、フリー百科事典。2016年9月13日20:33 UTC。2018年12月29日21:04 en.wikipedia.org
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