ビスマス亜硫酸寒天特別サルモネラエンテリカ亜種エンテリカ血清型チフス、サルモネラ属の他の種の間の分離のために処方、固体培地の選択と差動文化です。培地は英語のビスマス亜硫酸寒天の頭字語でBSA寒天として知られています。
亜硫酸ビスマス寒天の元の式は、1927年にWilsonとBlair（グルコースビスマス亜硫酸鉄培地）によって作成されました。亜硫酸ナトリウム、ブドウ糖、ビスマス溶液、クエン酸アンモニウム、硫酸第一鉄、寒天を含んでいた。
亜硫酸ビスマス寒天上でのサルモネラ属菌の48時間のインキュベーションの増殖。出典：Pixnio.com著者：WR Erving博士、USCDCP
今日、肉エキス、肉とカゼインのペプトン、亜硫酸ビスマス指示薬、ブドウ糖、リン酸二ナトリウム、硫酸第一鉄、鮮やかな緑色と寒天で構成される元の培地の変更があります。
サルモネラ種の分離には多くの手段がありますが、チフス菌の血清型を回復することになると、亜硫酸ビスマス寒天はそれらよりも顕著な利点があります。 。
しかし、腸内病原菌を分離しようとするときは、複数のタイプの培地を使用する必要があります。亜硫酸ビスマス寒天は、他のサルモネラ種やシゲラ属では効果が低く、阻害または発育が非常に悪いためです。この寒天で。
すべてのサルモネラ種のなかで、チフス菌血清型は人間の最も重要な腸内病原体の1つであり、これが唯一のリザーバーです。この血清型は、腸チフス、胃腸炎、菌血症、敗血症を引き起こします。
このため、存在が疑われる水、糞、または食品サンプルを分析するときに、この寒天を含めることが適切です。
基礎
ほとんどの培地と同様に、ビスマス亜硫酸寒天には、ペプトンや肉エキスなど、細菌の増殖を促進する栄養素が含まれています。同様に、グルコースはエネルギー源と炭素源として機能します。
ただし、亜硫酸ビスマス寒天が選択培地であるため、すべての細菌がこの培地で成長するわけではありません。グラム陽性菌と特定のグラム陰性菌の増殖を阻害する化合物が含まれています。これらの化合物は次のとおりです。インジケーター亜硫酸ビスマスと明るい緑色。
リン酸二ナトリウムは、培地の浸透圧とpHを維持します。
また、ビスマス亜硫酸寒天差動媒体であるHの形成を示し硫酸第一鉄の存在のおかげで2 S.ザH 2 Sは、硫酸第一鉄およびフォームはっきり見える不溶性黒色の沈殿物と細菌と反応することにより形成されています。
最後に、寒天は培地にしっかりした一貫性を提供します。
準備
52.3 gの脱水培地を量り取り、1リットルの水に溶解します。完全に溶解するまで、頻繁に攪拌しながら混合物を1分間沸騰させます。過熱しすぎないでください。極度の熱が培地に損傷を与えるため、この培地はオートクレーブできません。
滅菌ペトリ皿で提供する前に、45°Cに冷却して振ってください。厚さの良いプレートを作ることをお勧めします。これを行うには、25 mlを各プレートに注ぐ必要があります。固めましょう。滅菌されていない培地ですので、すぐに使用することをお勧めします。
ただし、1977年にD'aoustが実施した調査では、サルモネラチフィムリウムとサルモネラエンテリティディスの亜硫酸ビスマス寒天培地の熟成期間が長くなると、血清型のチフスとパラチフスBのパフォーマンスには影響しません。
D'aoustは、冷蔵の4日目にプレートを使用することをお勧めしますが、培地が古くなると選択性が低下し、Proteus vulgaris株がより簡単に発生することを警告しています。
このため、糞便などの汚染度の高いサンプルでは、新しく調製した培地を使用することをお勧めします。それ以外の場合は、準備の4日目に使用します。他の著者は、調理の翌日にプレートを冷蔵庫に保管して使用することを推奨しています。
チルドプレートは使用前に焼き戻しする必要があります。培地のpHは7.5±0.2です。生の培地はベージュで、準備された培地は緑がかった灰色の乳白色です。
用途
この培地に植えることができるサンプルの中には、糞便、飲用または廃水および食品のサンプルがあります。
分離株を改善するために、亜硫酸ビスマス寒天に播種する前に、乳糖ブロスによる濃縮前処理を行い、テトラチオン酸ブロスまたは亜セレン酸シスチンブロスによる濃縮後に実行することをお勧めします。
プレートを好気性環境で35°C±0.2で24〜48時間インキュベートします。
亜硫酸ビスマス寒天上のコロニーの特徴
サルモネラチフィのコロニーは、通常、24時間以内にこの寒天上に見られ、中心は黒色で、明るい緑色のハローに囲まれています。一方、硫化水素の形成により、48時間で完全に黒くなる。
-この培地は、シゲラ属のほとんどの種を阻害します。
-S. TyphiとS. arizonaeは非常に類似したコロニーを与えることができます。
・プロテウス、シトロバクターなどのH 2 S を産生する大腸菌群は、サルモネラ菌と同様のコロニーを形成するため、生化学的同定試験を実施する必要があります。
-孤立したコロニーを取得するには、良好な線条を実行する必要があります。サルモネラ属のコロニーの典型的な特徴を観察する唯一の方法です。
QA
無菌制御のために、未接種のプレートを37℃でインキュベートし、成長や色の変化がないことが期待されています。
品質管理のために、次のような既知の株：
Escherichia coli ATCC 25922、Salmonella enteritidis ATCC 13076、Salmonella Typhi ATCC 19430、Shigella flexneri ATCC 12022、Enterococcus faecalis ATCC 29212。
大腸菌および赤痢菌フレックスネリは、それぞれ緑がかった茶色および茶色のコロニーを発達させることにより部分的に阻害されると予想されます。一方、両方のサルモネラ菌は、金属の光沢を持つ黒いコロニーで優れた発達を示さなければならず、最終的にエンテロコッカスフェカリスは完全に抑制されなければなりません。
参考文献
- Wilson、W.&EM McV。ブレア。B. typhosusおよびB. proteusの分離のためのグルコースビスマス亜硫酸鉄培地の使用。衛生学のジャーナル、1927; 26（4）、374-391。.jstor.orgから取得
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