クロステスト：何のために、テクニック、根拠、フェーズ - 薬

クロスマッチは、実験室での研究の数は、ドナー（主に全血および充填球状）から血液製剤を受容者の血液と互換性があるかどうかを決定するために行われています。

これは、ABO互換性とRh因子に対する追加の補足テストです。クロスマッチングの理由は、2人の個人（ドナーとレシピエント）が同じABOグループとRhグループを持っていることがありますが、それでも彼らの血液には互換性がないためです。

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このような非互換性は、マイナー抗原として知られている一連の赤血球タンパク質に対する抗体の存在によるものです。これらの抗原は、血液型（ABO）およびRh因子に対するものであるため、日常的にテストされていません。

これは、マイナーな抗原は頻度がはるかに低く、個体ごとに変化する発現があるため、グループとRh因子で行われるように、それらをカテゴリーにグループ化することは事実上不可能です。

代わりに、ドナーの赤血球を患者の血清（メジャーマッチテスト）と混合し、患者の赤血球をドナーの血清（マイナーマッチテスト）と混合して、抗原抗体反応の存在を検出します。

患者の血清またはドナーの血清のいずれかにマイナーな抗原に対する抗体がある場合、検査は陽性であると言われるため、ほとんどの場合、特定の血液単位を輸血することができません。

ABOグループ

交差反応とは何かを完全に理解するには、まず血液型の基本を知る必要があります。

この意味で最も重要なことは、血液をA、B、AB、Oの4つのグループに分類できることを知ることです。

これらの各グループは、赤血球の表面で特定のタンパク質（抗原）を発現します。これは、異なるグループの潜在的な受容体の抗体によって外来要素として識別されます。

血液マッチングにおける抗原抗体反応の最も印象的なことは、抗体が存在するために抗原への事前の曝露が必要ないことです。これは天然抗体として知られています。

自然抗体

一般に、抗体が個体の体内に存在するためには、個体の白血球が以前に抗原に曝露されていることが必要です。

これは、外来抗原と生物との間の最初の接触では、抗体が存在しないことを意味します。これは、最初の接触の後に抗体が生成されるためです。したがって、過去に免疫システムに曝されていなかった場合、免疫系が特定のウイルスなどに対する抗体を持つことは不可能です。

上記の唯一の例外は、抗AB抗原です。これらのケースでは、他の人の赤血球と接触したことがない場合でも、その人の赤血球にはない抗原に対する抗体があります。これは天然抗体として知られています。

血液型に関連する抗原と抗体

血液型は、ABOシステムの場合、赤血球膜上の特定の抗原（AまたはB）の存在によって決定され、対照的に、赤血球膜上に存在しない抗原に対する抗体によって決定されます。

したがって、血液型Aの人は、血清中に抗B抗体が存在する一方で、赤血球の表面に抗原Aを発現します。

逆に、グループBの患者では、抗体が抗Aであるのに対し、B抗原が検出されます。

現在、AB血液の患者はA抗原とB抗原の両方を持っているため、抗体を使用するとその人の赤血球が破壊されるため、抗体はありません。

まったく逆のことがグループOで起こり、赤血球膜は2つの抗原（AでもBでもない）のいずれも提示しませんが、血清では抗A抗体と抗B抗体があります。

ABOグループの非互換性

上記から、赤血球膜の抗原を知ることにより、血清中の抗体が自動的にわかるので、ABO血液型の適合性を容易に推定することができます。そのため：

-Blood Aは、グループAおよびグループOと互換性があります。

-血液型Bは、血液BおよびOと互換性があります。

-グループOの人々はO血液しか受け取れません（抗A抗体と抗B抗体を持っているため）。ただし、抗原が不足しているため、血液は他のすべてのグループに問題なく届きます。

- 最後に。血液型ABを持っている人は、どの抗原に対する抗体も持っていないため、他のすべてのグループ（A、B、O、そしてもちろんAB）から血液を受け取ることができます。ただし、他のすべてのグループがこれらの赤血球を破壊する抗体を持っているので、グループABの人々だけがAB血液を受け取ることができます。

マイナー抗原

ABOグループと同様に、赤血球の表面に一連のタンパク質が見つかり、ABOグループの抗原と同じように抗原として機能します。

ただし、これらの抗原はすべての個体に存在するわけではありません。それらの組み合わせは不均一であり、浸透度（タンパク質発現のレベル）は可変であるため、ABOおよびRhに存在するようなグループへの分類は不可能です。これは、「低頻度抗原」としても知られている「マイナー抗原」に由来する名前です。

彼らは頻繁ではありませんが、マイナーな抗原に対する自然抗体があるかもしれません。その中で最も一般的なのは、ルイス、MNS、アンチN、ケル、ダフィー、アンチFyb、キッドです。それらのすべては、非常に深刻な溶血性および輸血後の反応に責任があります。

さらに、以前の輸血または交差免疫による前記抗原性タンパク質との以前の接触によるマイナーな抗原に対する感作の場合があり得る。

交差免疫

2つの異なるソース（赤血球とバクテリアなど）からの2つの抗原が非常に類似している場合、これらの抗原タンパク質の1つに対する抗体は、ほとんど同一であるため他の抗体とも反応するという点で、交差免疫があると言われています。

これをよりよく理解するために、前の仮説の例（赤血球と細菌からの抗原）を取り上げます。どちらの場合も自然抗体はありませんが、人が細菌にさらされた場合、それらはそれに対する抗体を生成します。

そのような抗体は、赤血球上の抗原が、抗体の形成を誘発した細菌の抗原と非常に類似している場合、後で赤血球に対して反応します。

これが起こった場合、拒絶反応が生じるため、その特定の抗原性タンパク質を含む赤血球を抗体を持っている人に与えることができません。ここに交差反応の重要性があります。

クロスマッチングとは何ですか？

マイナーな抗原に基づいて異なる個人の血液をグループ化することは不可能であるため、ある人の血液中に他の人の赤血球のマイナーな抗原に対する抗体があるかどうかを知る唯一の方法は、クロスマッチングです。。

抗体が存在する場合、溶血または凝集反応が引き起こされます。そのため、反応は陽性であったと結論付けられます。つまり、マイナーな抗原に対する抗体があります（ただし、どの抗原かは正確にはわかっていません）。そうでなければ、テストは陰性です。

基礎

クロスマッチは抗原抗体反応に基づいています。したがって、それらを使用すると、レシピエントの血清中にドナーの赤血球の抗原に対する抗体があるかどうか（またはその逆）を検出して、抗原抗体反応を誘発することができます。

抗体がない場合、反応は起こらず、検査は陰性と報告されます。反対に、反応が陽性である（試験中に溶血または凝集がある）場合、抗体が存在すると結論付けることができます。

この点で、ドナーとレシピエントの血清の両方に赤血球に対する抗体がある可能性があることに注意することが重要です。これが、2種類の交差反応がある理由です。

交差反応の種類

ドナーの赤血球に対する抗体が患者の血清中に存在する可能性があります。しかし、その逆、つまり患者の赤血球に対するドナーの血清中の抗体も発生する可能性があります。

これが、2種類のクロスマッチがある理由です。

-主要なクロスマッチ。

-マイナーなクロスマッチ。

どちらの検査も血液製剤を輸血する前に血液バンクで定期的に行われます。検査のいずれかが陽性の場合、患者の生命を危険にさらす可能性のある輸血反応のリスクが高いためです。

主要なクロスマッチ

このテストでは、レシピエントの血清にドナーの赤血球に対する抗体が含まれているかどうかを評価します。

これが起こった場合、患者の血漿中に存在する大量の抗体がドナーの赤血球を非常に迅速に破壊し、その過程でレシピエントの身体に壊滅的な反応を引き起こすため、血液製剤を投与することができません。これらの反応は非常に深刻なため、生命を脅かす可能性があります。

マイナークロスマッチ

この場合、ドナーの血清中にレシピエントの赤血球に対する抗体があるかどうかが判断されます。

もしそうなら、抗体はレシピエントの赤血球を破壊し始めます。ただし、抗体の量が限られているため、反応はそれほど強くありません。それはまだ危険ですが。

フェーズ

メジャーとマイナーの両方のクロスマッチは、3つのフェーズに分けられます。

-生理食塩水。

-サーマルまたはインキュベーション。

-クーム。

最初のフェーズでは、赤血球と血清が食塩水に混合されます。続いて、アルブミンを加え、サンプルを37℃で30分間インキュベートして、最終的にクームス期に進みます。

技術

クロスマッチテクニックは、ドナーの赤血球を患者の血清に加える（メジャークロスマッチ）とともに、レシピエントの赤血球をドナーの血清に加える（マイナークロスマッチ）ため、比較的単純です。

抗原抗体反応を比較的短時間で誘導するためには、一連の標準化されたステップに従う必要があります。これらの手順は、以下の簡単な方法で要約されています。

次のセクションでは、主要な互換性テストについて説明しますが、手順はマイナーな互換性テストでも同じですが、赤血球と血清の起源を交換することに注意してください。

生理食塩水相

-試験管に、レシピエントからの2滴の血清を追加します（マイナークロスマッチの場合はドナーから）。

-ドナーから（それがマイナーなクロスマッチの場合はレシピエントから）赤血球のサンプルを採取します。

-赤血球を洗浄し、遠心分離します。

-3％〜5％の溶液に再懸濁します。

-この溶液を一滴、レシピエントの血清を含むチューブに入れます。

-穏やかに混ぜます。

-遠心分離機。

-表示ランプで結果を読み取ります。

熱相

-生理食塩水相が完了したチューブに22％アルブミンを2滴加えます。

-37℃で30分間インキュベートします。

-15秒間遠心します。

-表示ランプで結果を読み取ります。

クームス相

-チューブから細胞を取り出し、生理食塩水で洗浄します。

-上清を除去します。

-クームス試薬を2滴加えます。