液浸油は、屈折率の高い粘性を有する透明な液体です。このため、顕微鏡の100倍の対物レンズを通過するときに光を集中させ、その分解能を高める特性を提供するため、顕微鏡観察で広く使用されています。
これは、粘性のフィルムが対物レンズと塗抹標本の間に形成され、光線が空気に到達したときに散乱するのを防ぎ、光線をサンプルに向けて集中させるために発生します。
油浸を備えたドロッパーと、油浸を使用した100倍の対物レンズを使用した顕微鏡。出典：Pixabay.com
液浸油は、100X対物レンズでのみ使用されます。そのため、100X対物レンズは液浸対物レンズとも呼ばれます。残りはドライターゲットとして知られています。このレンズは、イマージョンオイルなしでは使用できません。イマージョンオイルがないと、視覚化が不十分になるためです。
液浸油の主な機能は、他のレンズでは不可能な細部の観察を可能にする、より鮮明で鮮明な、より明確な画像を提供することです。
この目的で使用された最初のオイルは、アニスオイルで、ジョバンニバティスタアミチが作成した最初のイマージョンレンズと一緒に使用されました。これは色収差を防ぐだけでしたが、レンズシステムの開口数を増加させませんでした。
その後、シーダーオイルが使用されましたが、その使用を余儀なくされた多くの欠点がありました。その中には、その高い酸性度があり、短期的には目標を損なった。
その後、水やグリセリンなどの他の物質を使用して、合成液浸油が作成され、有機物質の複合化合物である現在の液浸油に到達するまで少しずつ精製されました。
液浸油の組成
液浸油は、テルフェニル、水素化テルフェニル、天然炭化水素、ポリブテンなどの有機化合物の混合物で構成されています。
液浸油の特性
液浸油は淡黄色の液体で、外観はやや粘性で、特有の臭いがあり、密度は0.92〜0.99 g / cm 3です。
液浸油 は水に溶けず、沸点は340°Cです。屈折率a（n 20°C / D）：1.482-1.516の範囲。一方、フラッシュインデックスは110°Cで、粘度の範囲は100〜120 mPa.sです。
この製品は生態毒性があるため、適切に廃棄する必要があります。つまり、環境に悪影響を及ぼし、主に水生動物に影響を与えます。一方、皮膚や粘膜に刺激を与えます。摂取した場合、腎毒性および心毒性があります。
液浸油は、保存する必要がある15〜25°Cで安定しています。
液浸油の基礎
より高倍率のレンズを使用する場合、光の強度を上げる必要があります。ただし、光線（カバースリップとレンズの間の空間）に到達すると散乱し、光線の一部が全反射するため、光線の多くは失われます。
液浸油はガラスに似た屈折率を持っています。したがって、100Xレンズとカバースリップの間にオイルが接触すると、光線が集中します。
集中した光線はサンプルを通過して画像を鮮明にします。つまり、対物レンズの開口数を増やし、色収差と球面収差を補正します。
用途または用途
診断を確立するために不可欠な詳細を確認するために最高倍率の対物レンズ（100X対物レンズ）を使用して画像をより広く観察する必要がある場合は特に、イマージョンオイルの使用が必要です。
そのため、組織学、細胞学、血液学、細菌学などのさまざまな分野の顕微鏡検査で広く使用されています。たとえば、患者の細胞や組織の特性を研究するのに役立ちます。
また、血液塗抹標本の分析にも使用されます。ここでは、微生物の形態形成特性を定義するために、赤血球の内外の血液寄生虫の特性を詳細に確認したい場合や、グラム製剤で使用します。
フレッシュプレパレーションでは推奨されないため、通常、固定されたプレパレーションで使用されます。これは、オイルの表面張力によりカバースリップが移動し、観察中にサンプルがずれて分析ができなくなるためです。
一方、イマージョンオイルは、従来の光学顕微鏡だけでなく、全反射蛍光（TIRFM）顕微鏡や共焦点蛍光アプリケーションでも使用されます。
イマージョンオイルを使用して準備を観察する手順
顕微鏡でスライドを表示するには、スライドを最初に最も低い倍率の対物レンズ（通常は10倍）に焦点を合わせ、光の強度を低くする必要があります。
次に、40X対物レンズに移動し、光路がわずかに増加します。一部の分析はこの倍率で実行できますが、構造の詳細を表示するには100Xの倍率が必要です。
100X対物レンズに移動する前に、カバースリップの観察したい場所に1滴のイマージョンオイルを置き、次に顕微鏡のタレットを動かして100X対物レンズを準備します。
光の強度は調整されます（増加します）（コンデンサーを動かして、ダイヤフラムを開くことによって）。次に、顕微鏡がパラフォーカル対物レンズを使用している場合、マイクロメータースクリューのいくつかの小さな動き（前方または後方）が完全に焦点を合わせます。
イマージョンレンズで直接準備の焦点を合わせようとすると、焦点を見つけるのが難しい場合があります。不可能なことではありませんが、難易度が大幅に上がります。
ケア
液浸油を使用するには、特定の条件を考慮する必要があります。
ギムザやグラムで染色された塗抹標本などの着色された準備ができたら、油に浸す前に、塗抹標本が完全に乾くのを待ちます。そうしないと、油と水がミセルを形成し、準備が見えなくなります。
一方、準備のバッチを観察した後、つまり、1日の終わりに、100X対物レンズはエタノール入りレンズペーパーを使用して注意深く洗浄する必要があります。レンズが汚れたままになっていると、オイルが付着し、レンズを取り除くのが非常に難しくなり、視野が損なわれます。
同様に、オイルは可燃性であり、熱源（ライター）から遠ざける必要があることを考慮する必要があります。65℃以上に加熱しないことが重要です。
最後に、油は有毒な製品です。したがって、皮膚や粘膜との直接の接触は避けてください。軽い刺激を引き起こす可能性があります。事故を避けるために、手袋と安全メガネの使用をお勧めします。
油に触れた場合は、その領域を大量の水で洗浄する必要があります。油が目に入った場合は、目を開いたまま、同じように洗います。誤飲した場合は、最寄りの医師の診察に加え、温水を摂取して嘔吐を起こすことが重要です。
参考文献
- 「総内部反射蛍光顕微鏡。」ウィキペディア、フリー百科事典。2018年12月30日22:46 UTC。2019年5月14日01:54
- IVD。顕微鏡の油浸。利用可能な場所：ユーザー/チーム/ダウンロード。
- 環境生物学と微生物学。光学顕微鏡の操作。eumed.net/librosで入手できます。
- サンチェスレラリタマリア、オリーバガルシアニンファローザ。顕微鏡の歴史と微生物学への影響。2015年牧師牧師。15（2）：355-372。で利用可能：scielo。
- Herrero J.実践No. 1：一般的な複合光学顕微鏡の基礎と使用。Universitat d´Alacantで入手可能：rua.ua.es/dspace
- シャーラウ-MSDS。顕微鏡用の液浸油。2001.入手可能：insumos-labcentral。