BHI寒天寒天培地またはブレインハートインフュージョンは、栄養固体培養です。スペイン語では、これを脳心臓注入寒天と呼びます。これは非選択的な培地です。つまり、すべてのタイプのグラム陽性菌とグラム陰性菌、および一部の酵母菌と糸状菌が発生する可能性があります。
それは、子牛の脳と心臓の注入、動物組織からの消化性加水分解物、カゼインの膵臓加水分解物、塩化ナトリウム、グルコース、リン酸二ナトリウムおよび寒天で構成されています。
BHIプレート。出典：著者MScが撮影した写真。マリエルサ・ギル。
BHI寒天は、細菌学研究室で最も頻繁に使用される培地の1つであることに注意してください。一次培養、他の選択培地で得られたコロニーのサブカルチャーとして、または実験室で菌株を維持するために、サプリメントなしで使用できます。
一方、血液寒天やチョコレート寒天などの濃縮培地の調製のベースとして使用するのに理想的な培地です。どちらも栄養の観点から要求の厳しい微生物を分離するのに理想的です。ただし、グルコースを含んでいるため、溶血パターンの観察には適していません。
同様に、BHI寒天培地は、一般的な培地で増殖が困難な病原微生物を分離するための特別な培地の調製に使用できます。
抗生物質添加剤を使用すると、BHI寒天培地は真菌分離用の選択培地になります。
基礎
これは、適度に要求の厳しい微生物を分離するための栄養価の高い培地であり、その濃縮は、血液やその他の栄養補助食品を加えることで高めることができます。
これは非選択的な培養培地であるため、ほとんどのグラム陽性菌とグラム陰性菌、および一部の菌類の増殖を可能にします。しかし、抗生物質を加えることで選択的にすることができます。
培地には、子牛の脳と心臓の注入、動物組織の消化性加水分解物、およびカゼインの膵臓加水分解物が含まれています。これらの化合物はすべて、ビタミン、アミノ酸、窒素、および炭素の供給源として機能します。
グルコースは、微生物が発酵させた後、微生物にエネルギーを提供する炭水化物です。一方、塩化ナトリウムとリン酸二ナトリウムは浸透圧のバランスを維持し、中性に近いpHを提供します。最後に、寒天は中程度の固体の粘稠度を与えます。
準備
52グラムの脱水した媒体を計量し、1リットルの蒸留水に溶解します。溶解プロセス中に頻繁に攪拌しながら、沸騰するまで混合物を熱源に持っていきます。
BHI寒天プレートまたはウェッジは、添加剤なしで調製できます。
厚切りポテト
ウェッジの準備については、各チューブの半分が満たされるまで準備を提供し、オートクレーブで覆い、121°Cで15分間滅菌し、離れるときは、固まるまで台の上に置きます。後で使用するまで冷蔵庫に保管してください。
バクテリオテクカ用BHIウェッジ。出典：著者MScが撮影した写真。マリエルサ・ギル。
プレート
溶解した混合物を121°Cで15分間オートクレーブし、放置してから50°Cに冷却し、培地20 mlを滅菌ペトリ皿に入れます。それらを固化させ、反転させ、使用するまで冷蔵庫に保管する。播種前にプレートを室温にします。
培地のpHは7.4±0.2に維持する必要があります。
生培地はベージュ色であり、調製培地は淡い琥珀色です。
血液寒天の準備
培地を滅菌した後、約45〜50°Cの温度に冷却し、血液（50 ml）を加え、穏やかに混合して均質化し、各ペトリ皿に20 mlを無菌で提供します。プレート上に泡が形成された場合は、軽い炎をすばやく泡の上に通過させて泡を消します。
同様に、混合物が45〜50°Cの温度に達したときに対応する添加剤を加えることにより、特別な培地を調製できます。
培地はチェリーレッドのままです。
用途
サプリメントなしで使用
添加物を含まないBHI寒天培地は、初代培養として、およびその後の同定のために要求度の低いまたは中程度の微生物の純粋な株を播種するのに役立ちます。
淡色の培地であるため、色素の観察に理想的です。干渉物質を含まないため、オキシダーゼやカタラーゼなどのいくつかの生化学的試験を行うことができます。または、これから他の生化学的試験をコロニーからマウントすることができます。寒天。
同様に、BHI寒天ウェッジは、実験室（バクテリオテカ）で一定期間菌株を維持するために広く使用されています。
表面に細菌株が播種されたプレートまたはウェッジは、37°Cで24〜48時間インキュベートされます。一方、真菌では、温度とインキュベーション時間は、求められている真菌の種類によって異なります。
他の培地の調製のためのベース寒天として
このベースで、濃縮された選択的な培地を調製できます。
濃縮
その主な機能は、微生物学研究室で日常的に使用するための血液寒天の準備のための基礎として機能することです。特に、BHI塩基はストレプトコッカス種の分離に役立ちます。しかしながら、グルコースを含んでいるため、溶血パターンの観察には適さないという欠点があります。
また、Haemophilus sp。を分離するためのウサギまたは馬の血液寒天の調製にも使用されます。最良の結果を得るには、強化サプリメント（IsoVitaleX）を追加できます。
サンプルが気道に由来する場合は、バシトラシンを寒天に添加して、付随するフローラを抑制し、ヘモフィルス属の回復の可能性を高めることができます。
あるいは、シスチンテルライトを含む血液寒天培地（ラムまたはヒト）を調製して、ジフテリア菌を分離することができます。同様に、Francisella tularensisを分離するためにシスチンとグルコースを添加してウサギ血液寒天を調製することは有用です。
血液寒天培地プレートの播種は完全に行われ、それらは微好気性（5-10％CO 2）で35-37°Cで24-48時間培養されます。
選択的
抗生物質を添加したこの培地は、菌類の分離のためにサブロー寒天培地を置き換えることができます。
BHI寒天培地とクロラムフェニコール（ゲンタマイシンまたはペニシリン）、ストレプトマイシン、および馬の血液の組み合わせは、Histoplasma capsulatumの分離に理想的です。
分離する微生物に応じて、好気性生物で35-37°Cまたは室温でのインキュベーションをお勧めします。2つのプレートを使用して、両方の温度範囲でインキュベーションが必要な場合があります。
Trichophyton mentagrophytesなどの菌類は、室温で最大7日間培養する必要があります。
QA
準備した各バッチから、1枚のプレートまたはウェッジを37°Cで24時間インキュベートし、増殖がないことを確認することをお勧めします。血液寒天は汚染されやすい培地であるため、血液寒天を調製する場合は特に重要です。
一方、培地の品質は、既知または認定された標準菌株を接種し、その発生を観察することにより評価できます。
この意味で、添加剤なしのBHI寒天を評価するには、大腸菌ATCC 25922、黄色ブドウ球菌ATCC 25923、またはカンジダアルビカンスATCC 10231の菌株を使用できます。すべての場合において、満足のいく成長が期待されます。
Streptococcus pyogenes ATCC 19615、Streptococcus pneumoniae ATCC 6305、またはTrichophyton mentagrophytes ATCC 9533の株を播種して、血液寒天プレートを評価できます。
菌株は微好気性で37°Cで24時間インキュベートし、真菌は湿気のあるチャンバー内で室温で最大7日間インキュベートします。すべてのケースで十分な成長が期待されます。
参考文献
- ブリタニア研究所。脳心臓注入寒天。2015。利用可能：britanialab.com。
- BD Laboratories。ブレインハートインフュージョン（BHI）寒天。2013.入手可能：bd.com。
- Laboratorios Difco Francisco Soria Melguizo、SAブレインハートインフュージョン寒天。2009。
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- ギル・M・ブラッド寒天：ファンデーション、用途、準備。2018.利用可能：lifeder.com。
- ウィキペディアの貢献者。脳の心臓注入。ウィキペディア、フリー百科事典。2018年9月19日03:58 UTC。wikipedia.orgで入手できます。2019年3月2日アクセス。
- Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリーとスコットの微生物学的診断。12 ed エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。