寒天サルモネラ、シゲラもSSとしても知られている寒天特に属、サルモネラ及び赤痢菌の腸内細菌、例えば臨床などの環境サンプルの両方の単離のために設計され、適度に選択及び差動媒体です。
SS寒天は複雑な組成を持っています。それは肉エキス、ペプトン、ラクトース、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸第二鉄、寒天、ニュートラルレッド、ブライトグリーン、蒸留水で構成されています。その優れた選択性を考えると、混合植物相が豊富なサンプルを播種することができます。
サルモネラ種のコロニーを持つSS寒天。出典:Wikimedia CommonsのManurx27
微生物学研究室では、サルモネラ・シゲラ培地が下痢便サンプル、下水、飲料水、食品中のサルモネラ菌と赤痢菌の存在を調査するために広く使用されています。
サルモネラ菌株を回収するために、前濃縮ブロス(乳糖ブロス)と濃縮ブロス(セレン化シスチンブロス)を使用する必要がある場合があります。
これらのステップは、非常に少量のサルモネラ菌の存在が疑われる場合、または株が主に加工食品などの工業生産のプロセスによって乱用される可能性がある場合に必要です。抗生物質で治療された患者の便検体を濃縮することもお勧めします。
続いて、濃縮ブロスを、サルモネラ菌シゲラ寒天や、キシロース寒天、リジンデオキシコール酸(XLD)、腸内ヘクトエン寒天(HE)などの他の同様の培地に播種できます。
基礎
サルモネラ・シゲラ培地の各成分には特定の機能があり、混合物は全体として、それを特徴付ける特性を備えています。
栄養力
肉抽出物とペプトン(カゼインと動物組織から消化)は、残りの成分を許容できる微生物の発生に必要な栄養素(窒素、炭素、ビタミン)を提供します。
一貫性
寒天は、培地にしっかりした一貫性を提供する責任があります。
選択的
この培地は、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、明るい緑色を含んでいるため、選択性が高くなります。したがって、すべてのグラム陽性菌と一部の大腸菌群を含むほとんどのグラム陰性桿菌の増殖を阻害します。
サルモネラ属の細菌といくつかの赤痢菌株は、これらの化合物をサポートしています。
主に、サルモネラ属は胆汁酸塩に対して非常に耐性があるため、常に細菌を便から排出しているキャリア患者の胆嚢に住むことができます。
微分
乳糖は、乳糖発酵菌株と非発酵菌株を区別するのに役立つ発酵性炭水化物です。この特性は、この培地ではフェノールレッドであるpHインジケーターの存在によって証明されます。
乳糖発酵株は赤いコロニーを与え、非発酵株は無色です。サルモネラ菌と赤痢菌は乳糖を発酵しないため、この特性は重要です。
一方、この培地には硫化物源としてチオ硫酸ナトリウム、鉄源としてクエン酸第二鉄が含まれています。どちらの化合物も、硫化水素を生成できる細菌を区別できます。これらは反応して、目に見える不溶性の黒色硫化第二鉄沈殿物を形成します。
この特性は、サルモネラ属のいくつかの株で見られます。通常、彼らのコロニーは平らな無色で、その中心に黒い点があります。残りのサルモネラはH 2 Sを産生せず、無色のコロニーとして成長します。
一方、赤痢菌属のコロニーは黒色化せず、無色透明である。
準備
この培地は準備が非常に簡単です。
脱水した市販の培地63 gを量り取り、1リットルの蒸留水に溶解します。溶液を加熱してかき混ぜます。混合物は数分まで沸騰する可能性があります。
この培地はオートクレーブしてはいけません。溶解後、シングルまたはダブルの無菌プレートで直接提供されます。
それらが固化すると、それらは血小板上に逆向きに配置され、使用するまで冷蔵庫(2-8°C)で保管されます。
調製後の培地は、pH 7.2±0.2のままで、オレンジがかった赤色になります。
サンプルを播種する前にプレートを暖めることが重要です。元のサンプルを直接播種して、寒天の一部に材料を排出し、そこから縞を付けることができます。
濃縮ブロスを使用する場合は、亜セレン酸ブロスの一部を通過させ、ドリガルスキーヘラで播種します。
好気性生物で37°Cで24時間インキュベートします。
重さを量るグラム数と培地の最終pHは、商業用住宅ごとに異なる可能性があることに注意してください。ミドルベースは常にその準備の兆候をもたらします。
使用する
糞便培養分析や、廃水、飲料水、食品サンプルの微生物学的研究で頻繁に使用されます。
多くの場合、ダブルプレートが準備され、片側にサルモネラシゲラ寒天培地が、もう一方のXLD寒天培地に配置されます。
制限事項
-一部の赤痢菌株は、この培地では増殖しません。したがって、この属の初代分離にはお勧めできません。
-中心が黒い透明なコロニーすべてがサルモネラ菌を示すわけではありません。一部のプロテウス株のコロニーはサルモネラのコロニーと区別がつかないため、生化学的検査を行って正確な識別を行う必要があります。
-脱水した培地は非常に吸湿性が高いため、環境への曝露に注意する必要があります。したがって、乾燥した十分に閉鎖された環境に保管する必要があります。非常に短い期間オープンします。
-時間の経過とともに、培地中の胆汁酸塩が沈殿し、寒天内のマットに似た画像を形成することがありますが、これは結果に影響を与えません。
-一部の赤痢菌株は、乳糖をゆっくりと発酵させることができます。
QA
培地が正しく機能していることを証明するために、既知または認定されたコントロール株を植えて、成長が期待される特性を満たしているかどうかを観察することをお勧めします。
このために、大腸菌、エンテロバクター種、肺炎桿菌、赤痢菌、ネズミチフス菌または腸球菌が使用できます。
期待される結果は次のとおりです。
エンテロバクターおよびクレブシエラ------大きなコロニーと赤またはピンクのムコイド。
Shigella flexneri ----------透明または無色の平らなコロニー。
Salmonella typhimurium ------中心が黒色の無色のコロニー。
Enterococcus faecalis --------完全阻害。
参考文献
- Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories。サルモネラ・シゲラ寒天。2009.利用可能:f-soria.es
- BDラボ。BDサルモネラ-シゲラ寒天。2013.利用可能:bd.com
- ブリタニア研究所。サルモネラ・シゲラ寒天。2015.次で入手可能:britanialab.com
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- Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W(2004)。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。