ファウスト技術は、いくつかの卵及び/又は浮遊させることによって糞便に含まれる寄生虫の幼虫の濃度を可能にする方法です。直接的な共生検査が陰性の場合、またはデトリタスのないクリーンなサンプルを取得したい場合に使用します。
共寄生虫学的検査の濃縮方法には、浮選、沈降、または前の2つを組み合わせた方法の3つのタイプがあります。これらの方法は、肯定的な結果の可能性を高めます。
便分析。
ファウスト法は、糞便サンプルの一部を、濃縮する卵や寄生虫よりも密度の高い物質と混合することで構成されます。これにより、密度が低くなり、表面に浮きます。上澄み液が収集され、同定と定量化のために顕微鏡下で観察されます。
この方法は、蠕虫の卵を視覚化するために使用されます。同時に、それは、世界中に広まっている鞭毛原虫であるジアルジアラムリアの診断のための非常に敏感な方法であることが証明されました。サナダムシや吸虫などの非常に重い寄生虫の卵には浮選法は推奨されません。
寄生虫は、特に衛生対策が不十分な貧しい国々で、世界中で最も広まっている腸感染症の1つです。このため、これらの寄生虫を識別および定量化するための高感度な方法があると、診断と治療に非常に役立ちます。
財団と資料
この技術は、浮遊法として硫酸亜鉛溶液を使用して、卵、寄生虫、嚢胞、幼虫、およびデトリタスの異なる比重の存在に基づいています。
この手法の背後にある理論的根拠は、サンプルを、より軽い卵、幼虫、または寄生虫よりも密度の高い硫酸亜鉛溶液と混合することです。
これにより、より重い要素が沈殿し、より軽い要素が浮遊し、サンプルの遠心分離後に上清に現れます。
材料
糞便サンプルの収集用コンテナ(出典:Wikimedia Commons経由のBobjgalindo)
-サンプルが以前に処理されている場合は、密度が1.18または1.2 g / mlの硫酸亜鉛溶液を準備します。
-以前にラベルが付けられた試験管でラックを準備します。
-遠心機を持っている。
-顕微鏡のスライドとカバーガラスを手元に用意します。すべてにラベルを付ける必要があります
-ルゴルの溶液がシートを染色するために利用可能であることを確認してください。
-ガーゼでろ過します。
-漏斗と蒸留水を持っています。
-ラベルの付いたプラスチックまたは段ボールの容器を探します。
-アプリケーターと5 mmの無菌ハンドル。
・ハンドルを消毒するライター。
手順
肉眼的および顕微鏡的検査
どのような便検査でも、検査はサンプルの「肉眼検査」と呼ばれるものから始まります。
一貫性、色、血のように見えるものの存在、粘液の存在、および成虫寄生虫の存在について説明します。
次に、便の「顕微鏡検査」に進みます。これは方法によって異なります。最も簡単なのは、寄生虫の最も簡単な顕微鏡観察法である直接塗抹法です。
腸内寄生虫、ガルディアランブリアの観察写真(出典:Wikimedia CommonsのRiddlemaster)
この手順では、少量のサンプルをスライドに直接配置します。サンプルと同じサイズの食塩水を数滴入れます。均質な混合物が形成されるまで、食塩水を便と混合します。カバーガラスを置き、顕微鏡下で調べます。
オリジナルのファウスト技法
2番目の手順は、ファウストのフロートメソッドで構成されています。
1-この目的のために、約2グラムの糞便を適切な容器に入れる。
2-硫酸亜鉛浮選液30 mlを加え、溶液と糞を混合して乳濁液を作ります。
3-金属ストレーナーで第2の容器に入れ、試験管に移します。
4-チューブにメニスカスが形成されるまで、さらに浮選液を追加します。
5-メニスカスにガラスのカバースリップを置きます。10〜15分間休ませます。
6-カバーガラスを取り外し、スライドの上に置きます。スライドは顕微鏡で検査されます。
遠心分離によるファウスト技術
元々、この方法は遠心分離を使用していませんでしたが、より良い結果が得られるようになりました。この手法には、適切な手順を達成するための一連のステップが含まれます。これらは次のとおりです。
1-糞を水で洗い、よく混ぜ、次に四つ折りにしたガーゼで濾過する。サンプルを試験管に入れます。
2-遠心分離し、上澄み(水上に保管されているサンプル)を除去します。上澄みが「透明」になるまで、ステップ1と2を繰り返します。
3-硫酸亜鉛をろ過して遠心分離したサンプルに加えます。
4-よく混ぜます。
5- 2500rpmで1分間再度遠心分離します(毎分回転数)。
6-上清を約5mmの滅菌ループで回収します。チューブを振ってはいけません。
7-上清から回収したサンプルをスライドに置き、ルゴールを一滴入れて着色し、カバースリップを置いて顕微鏡で観察します。
8-容器と試験管にはラベルが付いています。
利点
-診断に使用される要素は「汚れ」なくきれいに見えるため、シートの観察が容易になり、診断にかかる時間が短縮されます。
-上清では、幼虫、卵、および/または嚢胞の両方が回収されます。
-非常に安価な方法です。
-手順は非常にシンプルで実装が簡単です。
-診断は迅速かつ正確です。
-貧しい国では寄生虫症の重要性と発生率が高いため、これらの低コストで使いやすい方法は、これらの病変の診断とモニタリングに最適です。
短所
浮選溶液の密度は幼虫の収縮を引き起こします。つまり、幼虫は収縮し、非常に短期間で変形します。これにより、審査官は直ちに診断を下す必要があり、処理されたサンプルは将来の検査のために保管できません。
すべての顕微鏡による識別方法と同様に、正確な診断を行うには、経験豊富な検査スタッフが必要です。
診断に必要な要素の急速な変形は、明らかに欠点ですが、顕微鏡ですぐに観察することで修正できます。
参考文献
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