胆汁エスクリン寒天選択と差動媒体固体培養です。特定の微生物が胆汁を含む培地で成長する能力を決定し、またグルコシドエスクリンをエスクレチンとグルコースに分解する診断テストとして使用されます。
この診断テストは、グループD（胆汁エスクリン陽性）に属するストレプトコッカス属の種を、このテストに否定的に反応する他のストレプトコッカスグループから区別するために使用されます。
腸球菌株を接種した胆汁エスクリン寒天プレート（テスト陽性）。出典：機械可読の著者は提供されていません。Philippinjlが仮定した（著作権の主張に基づく）。
viridansグループの一部の連鎖球菌はエスクリンを加水分解できますが、40％の濃度の胆汁の存在下では増殖できないため、この培地ではこのグループの反応は陰性です。
一方、これらの微生物は胆汁エスクリン陽性であるため、胆汁エスクリン培地はリステリア菌またはエアロコッカス種の診断にも有用です。
エスクリン胆汁寒天は、ペプトン、肉エキス、牛胆汁、エスクリン、クエン酸鉄、寒天、蒸留水で構成されています。一部の商業施設では、培地の組成にアジ化ナトリウムが含まれています。
すべての化合物が別々にある場合、培地は実験室で調製するか、市販の脱水培地から調製できます。
基礎
胆汁エスクリン培地にはペプトンと肉エキスが含まれており、どちらの化合物も微生物の増殖に必要な栄養素を提供します。
また、エスクリンが含まれています。この化合物は、単純な単糖（グルコース）と、6,7-ジヒドロキシクマリンまたはエスクレチン（アグルコン）と呼ばれる化合物とのアセタール結合またはグルコシド結合で結合したグリコシドです。
テストは、バクテリアがエスクリンを加水分解できるかどうかに基づいています。これが発生すると、エスクリンはエスクレチンとグルコースに分解されます。エスクレティナは培地に存在する鉄と反応し、暗褐色のほぼ黒色の化合物を形成します。
これは、クエン酸第二鉄が反応展開剤として機能することを意味します。この特性により、Bile Esculin寒天は分化培地になります。
その一部として、胆汁はいくつかの微生物の成長を妨げる阻害剤であり、したがって、細菌は、エスクリンを分割する前に、胆汁の存在下で成長できなければならない。したがって、この培地は選択的であると見なされます。
この環境で発生する可能性のある細菌は、主に腸内環境に生息する細菌です。
この意味で、一部の企業は、アジ化ナトリウムを培地に添加して、腸内グラム陰性桿菌の増殖をさらに阻害し、ストレプトコッカスの増殖に対する培地の選択性を高めています。
最後に、寒天は培地に固体のコンシステンシーを与え、水は化合物の溶媒です。
準備
胆汁エスクリン寒天の自家製調製
計量する：
5 gペプトン
肉エキス3 g
牛肉胆汁40g
エスクリン1 g
クエン酸鉄0.5 g
寒天15 g
蒸留水1000 ml
アジ化ナトリウムを添加する場合、0.25 g /リットルを秤量して混合物に添加する。
成分を蒸留水1リットルに溶解し、化合物が完全に溶解するまで加熱します。5 mlを16 x 125 mmスクリューキャップテストチューブに分配します。121°C、15ポンドの圧力で15分間オートクレーブします。
オートクレーブから取り出し、チューブをサポート上で傾けると、寒天は広いフルートビークで固化します。
使用するまで冷蔵庫に保管してください。播種前に室温にします。
胆汁エスクリン寒天プレートも準備できます。この場合、混合物全体をフラスコでオートクレーブし、続いて滅菌ペトリ皿に分配します。固めて冷蔵庫に保管します。
培地のpHは6.6±0.2でなければなりません。
商業培地からの胆汁エスクリン寒天の調製
インサートで指定された量を計量します。これは、ビジネスハウスごとに異なります。以降は上記と同様に進めてください。
培地のpHは6.6±0.2でなければなりません。脱水した培地の色はライトベージュで、調製した培地は濃い琥珀色です。
市販の胆汁エスクリン培地。出典：著者MScが撮影した写真。マリエルサ・ギル。
用途
胆汁エスクリン培地は、主にグループD連鎖球菌（胆汁エスクリン陽性）を他の連鎖球菌群（胆汁エスクリン陰性）と区別するために使用されます。
過塩培養液の増殖試験と胆汁エスクリン試験を組み合わせると、Enterococcusと呼ばれるD群連鎖球菌の特別なグループを特定できます。
Streptococcusのこの特別なグループは、前述の属のグループDに属し、グループDの他のメンバーと同様に、胆汁の存在下でエスクリンを加水分解することができますが、過塩培地（BHIの塩化物を含むBHI）で発生することもできます6.5％ナトリウム）、違いを生む特性。
したがって、エスクリン胆汁を加水分解するが、過塩培養液では成長しない連鎖球菌は、非腸球菌グループD連鎖球菌と呼ばれます。
播種
純粋なトッドヒューイットの24時間培養液から培地を接種します。
パスツールピペットで培地の表面に2滴を加え、プラチナループで培地に広げます。
35°Cで48時間インキュベートしますが、インキュベーション時間は満たされますが、陽性反応があるかどうかを監視することができます。時間が経過しても反応が陰性のままである場合は、最大72時間インキュベートできます。
解釈
陽性反応：フルートのくちばし（チューブテストの場合）の暗褐色、ほとんど黒い色の出現、またはコロニーの周りの寒天（プレートテストの場合）の黒化。
陰性反応：72時間のインキュベーション後、培地の黒化または黒がチューブの半分未満に現れない。一方、黒色を示さない培地での細菌の増殖は、陰性試験とみなされます。
QA
培地の品質を評価するには、Enterococcus faecalis ATCC 29212株を陽性対照として、グループDに属していないStreptocococus株を陰性対照として使用する必要があります。
制限事項
-アジ化ナトリウムを含まない培地は、腸内グラム陰性桿菌の増殖を可能にします。それらのいくつかは真ん中を黒くすることができます。
-一部の商業施設では低濃度の胆汁（10％）を添加しているため、グループDに属さない一部の連鎖球菌は培地で発生し、エスクリンを加水分解し、解釈に誤りを生じる可能性があります。
参考文献
- Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W（2004）。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。
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- 「胆汁エスクリン寒天」ウィキペディア、フリー百科事典。2017年8月22日、17：30 UTC。2019年4月22日17:35。es.wikipedia.org。
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- Neogen Laboratories。胆汁エスクリン寒天。で利用可能：foodsafety.neogen.com