フォーゲル・ジョンソン寒天は、特別に、黄色ブドウ球菌の単離のために処方、固体培地の選択と差動文化です。この培地は、1955年にZebovitz、Evans、およびNivenによって処方されたテルライトグリシン寒天の改変からVogel and Johnsonによって1960年に作成されました。
改変は、培地中に存在するマンニトールの濃度を増加させること、およびpH指示薬を組み込むことからなった。現在の処方は、トリプテイン、酵母エキス、マンニトール、リン酸二カリウム、塩化リチウム、グリシン、フェノールレッド、寒天、1％テルル酸カリウム溶液、および水で構成されています。
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フォーゲルジョンソン寒天のような、塩辛いマンニトール寒天やベアードパーカー寒天などの黄色ブドウ球菌の分離に選択的である他のメディアがあることに注意すべきです。この意味で、フォーゲル・ジョンソン寒天の基礎は、塩味のあるマンニトール寒天とベアードパーカー寒天の混合であると言えます。
最初に、S。aureusのコロニーは、マンニトールを発酵させ、pHインジケーターを黄色に変えることで区別されます。一方、2番目の黄色ブドウ球菌は、テルライトをテルルに還元し、灰色から黒色のコロニーを形成することを特徴としています。どちらの特性もVogel-Johnson寒天で観察されます。
この培地は、その対応物と同様に、食品サンプル、工業製品の衛生管理、および臨床サンプルにおける黄色ブドウ球菌の検出に役立ちます。
基礎
栄養素の供給
Vogel-Johnson培地にはトリプテインと酵母エキスが含まれています。どちらの物質も、細菌の増殖に必要な炭素と窒素の供給源として機能する長鎖アミノ酸を提供します。この培地で増殖できる細菌は、これらの物質から栄養素を摂取します。
選択力
Vogel-Johnson寒天は、グラム陰性菌および一部のグラム陽性菌の成長を阻害することができ、コアグラーゼ陽性ブドウ球菌の発生を促進します。阻害物質は、亜テルル酸カリウム、塩化リチウム、グリシンです。
微分力
この差別的な媒体を作る物質は、マンニトールとテルル酸カリウムです。マンニトールは炭水化物であり、発酵すると、培地が赤から黄色に変わる酸が生成されます。これは、赤いフェノールpHインジケーターの存在によって起こります。
一方、無色のテルライトは、還元されて遊離の金属テルルになると、濃い灰色から黒色になります。
Staphylococcus aureusはマンニトールを発酵させ、テルライトをテルルに還元します。このため、この培地での黄色ブドウ球菌の典型的なコロニーは、黄色の培地に囲まれた灰色または黒色です。
この培地で増殖し、テルライトまたは発酵マンニトールを減少させない細菌は、ペプトンの使用による培地のアルカリ化により、元の色よりも強い赤色の培地で囲まれた透明なコロニーを形成します。
一方、テルライトを減少させるがマンニトールを発酵させない細菌は、濃い赤色の培地に囲まれた灰色または黒色のコロニーとして成長します。
テルル酸カリウムを添加せずに培地を調製した場合、黄色ブドウ球菌のコロニーは、塩味のあるマンニトール寒天のように黄色の培地に囲まれた黄色のコロニーとして成長します。
浸透圧バランスと固化剤
リン酸二カリウムは、培地の浸透圧バランスを維持し、pHを中性7.2に調整します。寒天は、培地に固体の一貫性を与えます。
準備
テルライトカリウム溶液1％w / v
この溶液はオートクレーブで滅菌できないため、脱水培地には含まれていません。このため、これは個別に準備され、すでに滅菌済みの培地に追加されます。
一部の商業施設では、すぐに使用できる1％テルル酸カリウム溶液を販売しています。実験室で準備したい場合は、次の手順に従ってください。
1.0 gのテルル酸カリウムを量り取り、100 mlの蒸留水を測定します。テルル酸カリウムを水に溶かし、100mlになるまで水を加えます。ろ過法で溶液を滅菌します。
フォーゲルジョンソン寒天培地
60グラムの脱水培地を量り取り、1リットルの蒸留水に溶かします。完全に溶解するために、混合物を沸騰するまで加熱する。溶解プロセスの間、媒体は頻繁に攪拌されます。
15ポンドの圧力と121°Cで15分間オートクレーブで滅菌します。オートクレーブから取り出し、培地が約45〜50°Cの温度に達するまで静置します。以前に調製した20％テルル酸カリウム溶液20mlを追加します。
混合し、滅菌ペトリ皿に注ぎます。使用するまで冷蔵庫で後で保管するために、プレートホルダー上で固化して反転させて注文できるようにします。
調製した培地の最終pHは7.2±0.2です。
サンプルを播種する前に、プレートが室温になるまで待ちます。
調製した培地の色は赤です。
使用する
あらゆるサンプルの黄色ブドウ球菌の分離に使用できますが、主に医薬品、化粧品、食品の微生物分析に使用されます。
接種材料は濃密にすることをお勧めします。播種は、プラチナハンドルでスコアリングするか、Drigalskiスパチュラで表面を削ることで行うことができます。
プレートを35-37°Cで24〜48時間好気性菌培養します。
QA
Vogel-Johnson培地の品質管理には、以下の管理菌株を使用できます。
Staphylococcus aureus ATCC 25923、Staphylococcus aureus ATCC 6538、Staphylococcus epidermidis ATCC 12228、Escherichia coli ATCC 25922、またはProteus mirabilis ATCC 43071。
予想される結果は次のとおりです。黄色ブドウ球菌株の成長は、黄色の培地に囲まれた黒いコロニーで十分です。S. epidermidisの場合、赤の培地で囲まれた半透明または黒色のコロニーで定期的に増殖します。
同様に、大腸菌では完全な阻害が予想され、プロテウスミラビリスでは部分的または完全な阻害が予想されます。成長すると、それは控えめになり、コロニーは黒色に囲まれ、赤色になります。
参考文献
- BD Laboratories。VJ（Vogel and Johnson Agar）。2006.利用可能：bd.com
- ブリタニア研究所。Vogel- Johnson Agar。2015.次で入手可能：britanialab.com
- ブリタニア研究所。テルル酸カリウム。2015.次で利用可能：britania.com
- ハイメディア研究所。Vogel- Johnson Agar Medium。2018.利用可能：himedialabs.com/TD/MU023.pdf
- フォーゲル-ジョンソン寒天基地。メルク微生物学マニュアル。第12版、pp 502-503。利用可能な場所：ユーザー/チーム/ダウンロード
- ウィキペディアの貢献者、「ÁgarVogel Jonhson」、ウィキペディアは百科事典無料、wikipedia.orgで入手可能。
- ベネズエラ標準コヴナン1292-89。（1989）。食品。黄色ブドウ球菌の分離と列挙。入手可能：sencamer.gob.ve