XLD寒天：根拠、準備、および使用 - 生物学 - 2025

XLD寒天培地寒天またはキシロースリジンデソキシコールは、腸管病原体の単離のための選択と差動固体培養です。テイラーは、赤痢菌属の分離を改善するために、XL寒天（キシロース、リジン）フォーミュラを設計しました。

彼は、腸内病原菌の分離を目的としたほとんどの培地でこの属が阻害されたことを観察しました。その後、デオキシコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸第二鉄アンモニウムを添加して、その選択性を高めました。この式は、赤痢菌とサルモネラ菌の両方の分離に役立つことが証明されています。

XLD寒天上での赤痢菌、サルモネラ菌および大腸菌群のコロニーの違い。A. Shigella sp、B。Salmonella sp、C。Coliforms。出典：A.作成者：CDC / Amanda Moore、MT; トッドパーカー博士 オードラマーシュ、提供：公衆衛生画像ライブラリB. https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-_Showing_H2S_production_-_Detail.jpg C.作成者：CDC / Dr. JJ農家、提供：公衆衛生画像ライブラリ

XLD寒天は、酵母エキス、デオキシコール酸ナトリウム、キシロース、リジン、乳糖、ショ糖、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸第二鉄アンモニウム、塩化ナトリウム、フェノールレッド、寒天で構成されています。XLD寒天培地およびSS寒天培地デュオは、ほとんどの細菌学研究所で、赤痢菌とサルモネラ菌の糞便サンプルを研究するために使用されています。

他の研究室では、他の利用可能なオプションの中でも、CHROMagar SalmonellaとXLD寒天の組み合わせを好んでいます。これらのデュオは、ダブルペトリ皿で調理できます。一方の側にXLD寒天培地を置き、もう一方の側に他の選択した培地を置きます。

基礎

-栄養力

XLD寒天には酵母エキスが含まれており、この寒天で生育する微生物の栄養源として機能します。さらに、炭水化物（キシロース、スクロース、およびラクトース）の存在は、それらを発酵できる細菌にエネルギーを提供します。

-培地の選択性

阻害物質として、デオキシコール酸ナトリウムを提示します。これはグラム陽性菌の増殖を防ぎ、培地に選択的な特性を与えます。

-微分力

典型的な赤痢菌のコロニー

すでに述べたように、XLD寒天にはキシロースが含まれています。この炭水化物は、赤痢菌属を除いて、この培地で成長するすべての細菌によって発酵されます。

Shigellaコロニーは他のバクテリアが黄色のコロニーを作る一方で、赤いコロニーを発達させることによって他のコロニーと区別されるため、これはその特徴的な特徴を与える特徴の1つです。

サルモネラの典型的なコロニー

サルモネラ属もキシロースを発酵させ、最初は黄色のコロニーを生成します。しかしながら、炭水化物キシロースを使い果たした後、それはその酵素であるリジン脱炭酸酵素のためにリジンを攻撃します。リジンの脱炭酸により、コロニーと周囲の培地の色が元の赤に変わるアルカリが生成されます。

リジンを脱炭酸する大腸菌群は培地をアルカリ化できないため、この挙動はサルモネラによってのみ実行されます。これは、大腸菌群が存在するラクトースとスクロースも発酵させるためです。したがって、酸の生成が非常に高く、これらの細菌に黄色のコロニーが残ります。

サルモネラ属はスクロースまたはラクトースを発酵しないことに注意する必要があります。

Hの生産

XLD寒天は、H ₂ S 産生サルモネラ種の検出も可能にします。このため、チオ硫酸ナトリウムに代表される硫黄源とクエン酸第二鉄アンモニウムである反応現像液に依存しています。

後者はH ₂ S（無色のガス）と反応し、硫酸鉄の目に見える不溶性の黒色沈殿物を形成します。この意味で、サルモネラコロニーの特徴は、中心が黒く赤くなります。

H ₂ S 形成反応が起こるためには、アルカリ性pHが必要であることに注意すべきである。H ₂ S を形成する他の腸内細菌科は、存在する炭水化物の発酵によって生成される高い酸性度が反応を阻害または妨害するので、この環境ではできないか、不十分です。

-塩化ナトリウム、寒天、フェノールレッド

最後に、塩化ナトリウムは浸透圧のバランスを維持します。寒天は固化剤であり、フェノールレッドはpHの変化を検出し、コロニーと培地の色を変えます。

準備

55 gの脱水XLD培地を量り取り、1リットルの水に溶解します。沸点に達するまで混合物を加熱してかき混ぜます。熱が培地を損傷し、典型的なコロニーの形態を変える沈殿物を作成するため、過熱しないでください。

この培地はオートクレーブしてはいけません。溶解するときは、50℃のウォーターバスに通す必要があります。冷却時は、滅菌ペトリ皿に直接入れてください。シングルプレートまたはダブルプレートに注ぐことができます。それらは固化するために放置され、使用するまで冷蔵庫に保管されます。

使用前に調質してください。無菌培地ですので、使用日近くに調製することをお勧めします。

培地の最終pHは7.4±0.2です。調製した培地の色は、沈殿物がなく、橙赤色の半透明です。

キシロースリジン（XL）ベース寒天をお持ちの場合は、デオキシコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸鉄アンモニウムを追加できます。このようにして、XLD寒天処方が得られます。

用途

XLD寒天は、主に赤痢菌属、第二にサルモネラ属の腸内病原菌の回収に使用されます。便、水、食品サンプルの評価に役立ちます。

サンプルの種類

糞便

糞便サンプルをXLD寒天に直接播種し、材料を適切に分散させて、分離したコロニーを得ることができます。

サルモネラ菌の回復を改善するには、XLD寒天培地をサルモネラ菌濃縮培地からストリークします。

食物

食品の場合、サルモネラ菌と赤痢菌の濃縮培地を使用できます。サルモネラ菌には、亜セレン酸シスチンブロス、鮮やかな緑色のテトラチオン酸ブロスなどを使用できます。

赤痢菌の場合は、0.5 µ / mlのノボビオシンを含む赤痢菌培養液で濃縮し、42°±1°Cで16〜20時間インキュベートできます。

水

水の分析では、特に、膜ろ過技術とXLD寒天の使用が推奨されます。

植栽と識別条件

播種した培地を好気的に35°Cで24〜48時間インキュベートします。

各属の典型的なコロニーが観察され、疑わしいコロニーはその同定のために生化学的試験を受けなければなりません。

QA

培地の品質管理を評価するために、次の細菌株を使用できます。 、Klebsiella pneumoniae ATCC 33495。

サルモネラ属は、この培地上に黒い中心を持つ赤いコロニーまたは完全に黒いコロニーを提示することによって特徴付けられます。一方、赤痢菌属では、コロニーは赤、つまり培地の色でなければなりません。

大腸菌の場合、それは完全にまたは部分的に阻害されると予想される。成長するとコロニーは黄色になります。プロテウスミラビリスの場合、黒い中心の有無にかかわらず、ピンク色のコロニーでは成長が期待できません。最終的に、クレブシェラ属は黄色のコロニーとして成長します。

最終的な考え

XLD寒天培地は、赤痢菌の回収効率が高いため、細菌学研究室で広く使用されており、サルモネラ属も良好に回収されます。

Rall et al。（2005）は、「家禽中のサルモネラ菌検出用の3つの強化培養液と5つの固形培地の評価」と題する彼らの研究で、3つのクラシック培地（明るい緑色寒天、SS寒天、XLD寒天）のそれを実証しました。 、XLD寒天培地の回収率が最高でした。

回収率は次のとおりでした：明るい緑色の寒天で13.8％、SSで27.6％、XLDで34.5％。回収率48％のランバッハ寒天培地と79.3％のCHROMagar培地は発色培地のみを上回りました。

参考文献

1. 食中毒。細菌性赤痢。入手可能な場所：anmat.gov.ar
2. 「XLD寒天」ウィキペディア、フリー百科事典。2019年2月9日11:46 UTC。2019年4月10日、19：25 wikipedia.org
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5. フランシスコソリアメルギゾラボ。XLD寒天。入手可能場所：http://f-soria.es/Inform
6. Rall L、Rall R、Aragon C、SilvaM。家禽のサルモネラ菌検出のための3つの強化培養液と5つのプレーティングメディアの評価。ブラズ。J.微生物。2005; 36（2）：147-150。利用可能：scielo.br
7. Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリーとスコットの微生物学的診断。12 ed エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。