ラクトースブロスを非手段である - として主に使用される選択液体培地加工食品、乳製品又は水に微生物学的分析からサルモネラ菌株の単離前濃縮。これは、食品の微生物学的仕様に関する国際委員会（ICMPF）によって推奨されています。
培地には、細菌の増殖に必要な物質であるゼラチン、肉エキス、乳糖の酵素消化物が含まれています。さらに、ラクトースは発酵性炭水化物であるため、一部の大腸菌群では、ガスの生成によってそれを分解することができます。
濁りのある乳酸菌培養液。出典：著者MScが撮影した写真。マリエルサギル
このため、ラクトースブロスは全公衆衛生および糞便性大腸菌の推定研究のために米国公衆衛生協会（APHA）により推奨されており、最も可能性の高い数（MPN）の標準的な手法でトリプトースラウリル硫酸ブロスを置き換える優れた代替品として認定されています。 ）、食品、牛乳、地表水、地下、レクリエーション、家庭および産業廃棄物のサンプルの微生物学的分析に使用されます。
基礎
一部のサンプルの微生物学的分析では、非常に少量の、または生存率に違反または最小限に抑える不利な条件の特定の微生物を回収できるようにするために、前濃縮ステップが不可欠です。
サルモネラ種で汚染されている可能性のある乾燥食品や加工食品の場合がそうです。これらのケースでは、細菌が存在する場合、製品の製造プロセス中に細菌が物理的および化学的に乱用されています。
微生物が脱水、阻害性または有毒な製品への曝露、およびとりわけ他の細菌のより大量の存在によって生成される重複などの有害な要因に曝露されるような方法で。
この意味で、ラクトースブロスは微生物の損傷した構造に修復効果があり、微生物を検出および検出できるように回復および再生させます。
同様に、ラクトースブロスは、その生存能力に影響を与える可能性のある阻害物質を希釈する能力があり、その開発を可能にします。さらに、ラクトースブロスの栄養組成は、他の微生物よりもサルモネラ種の増殖を促進するために戦略的です。
最終的な識別のために、それは他の決定的な培養培地に継代培養されなければなりません。
一方、培地の組成により、ガスを産生する乳糖発酵微生物の検出も可能です。
準備
1リットルのラクトースブロスを準備するには、13グラムの脱水培地を計量し、1000 mlの蒸留水に溶解する必要があります。
媒体を水に溶かすのを助けるために、溶液を少し加熱することができますが、あまり加熱しないでください。
均一になると、溶液は次のように準備されます。ブロスを使用して大腸菌群を検索する場合は、試験管のラックを準備し、そこにダーラム発酵管を逆さまに挿入します。
ダーラムチューブは非常に重要な詳細です。これは、大腸菌群の検索で非常に価値の高いデータであるガス生成の検出を可能にするためです。
チューブの準備ができたら、10 mlのラクトースブロスをチューブに分注します。これは、ダーラムチューブ全体を覆うのに十分な量でなければなりません。
ラクトースブロスを前濃縮ブロスとして使用する場合、ダーラム発酵チューブを配置する必要はありません。この場合、大量の培地（225 ml）が必要です。これは、500 mlボトル、広口、耐熱性スクリューキャップ付きで提供されます。
続いて、チューブまたはフラスコを121°Cで15分間オートクレーブします。
培地は25℃で6.9±0.2の最終pHに留まる必要があります
ブロスは使用するまで冷蔵庫に保管されます。
使用する前に、ブロスを室温にする必要があります。
一方、乳糖ブロスは2倍の濃度で調製することもできます。
一部の研究所では、pH指示薬としてブロモクレゾールパープルをラクトースブロスに追加して、色の変化によりラクトースが発酵したチューブを示しています。この場合、ブロスは紫色になり、発酵があれば黄色になります。
用途
微生物検査室では、ラクトースブロスは信頼性が高く迅速な結果（24〜48時間）を提供する比較的安価な培地であるため、広く使用されています。
食品や水中の大腸菌群や糞便中の大腸菌群の分析や、サルモネラ菌の前培養液として使用できます。
事前濃縮
前濃縮は、サンプル濃縮の前のステップであり、加工食品中のサルモネラ属の細菌の回収率を大幅に向上させます。
これを行うには、固形食品サンプル（25グラム）または液体（25 ml）を225 mlのラクトースブロスに播種し、24〜48時間インキュベートします。その後、亜セレン酸シスチンブロスやテトラチオン酸ブロスなどの濃縮培地で継代培養されます。次に、XLDおよびSS選択メディアに進みます。
総および糞便性大腸菌分析
糞便汚染の指標として優れた培地です。
このため、ラクトースブロスは、Most Probable Number法による大腸菌群の推定段階に最適です。
大量の大腸菌群が疑われるサンプルの場合、接種される量は少なく（1 ml）、一方、少量の大腸菌群が疑われるサンプルの場合は、大量のサンプル（10 ml）が接種されます。
、分析のために10 -1、10 -2、10の-3希釈液を作られ使用される各濃度について3-5チューブの電池を形成します。
各希釈から、同じ容量が乳糖ブロスに播種されます。
チューブを24時間インキュベートします。陰性培養液をさらに24時間インキュベートします。
結果の解釈は、2つの特性を観察することによって行われます。1つ目は濁りの有無であり、この媒体にはpHインジケーターが含まれていないため、色の変化はありません。
二つ目はガスの生産か否かです。ガスは、内部に1つまたは複数の気泡が現れることにより、ダーラムチューブ内で容易に確認できます。
両方の特性、つまりガス生成による濁度が観察された場合は、陽性と見なされます。陽性のチューブは確認用培地（2％Brilliant Green Bile brothおよびEC broth）に再播種する必要があります。
培地の品質管理
-培地を準備するとき、その目的が大腸菌群を研究することである場合は、ダーラム管を配置することを忘れないことが重要です。
-滅菌前に培地を過熱しないでください。
-滅菌前にはテストチューブで配布してください。
・培地が生後3ヶ月以上の場合は使用しないでください。
-培地の通常の特性に変化が見られる場合は使用しないでください。
-乳糖ブロスのバッチを準備するときは、Escherichia coli、Enterobacter aerogenes、Citrobacter freundii、およびKlebsiella pneumoniaeなどの既知の株を播種して品質をテストします。それらは、ガス生産（ポジティブコントロール）により、非常によく成長します。
-緑膿菌、ネズミチフス菌、またはエンテロコッカスフェカリスも含まれますが、これらはよく増殖しますが、ガス産生はありません（ネガティブコントロール）。
-脱水後の培地の元の色はベージュで、準備した培地の色は非常に明るく透明な黄色であることに注意してください。色や外観に変化が見られる場合、劣化することがあります。
参考文献
- Acevedo R、Severiche C、CastilloM。環境生物学と微生物学。（2013）初版。カルタヘナ大学、コロンビア。
- カマチョA、ジャイルズM、オルテゴンA、パラオM、セラーノB、ベラスケスO.（2009）。食品の微生物学的分析のための技術。第二版 化学部、UNAM。メキシコ。
- Conda Pronadisa Laboratories。2017.乳糖ブロス2倍濃度（European Pharm。）
- Fernández-RendónC、Barrera-Escorcia G.メキシコ、ソチミルコ湖の堆積物から大腸菌群を抽出する手法の比較。牧師。微生物。2013; 45（3）：180-184。入手可能：scielo.org。
- Sotomayor F、Villagra V、Cristaldo G、Silva L、IbáñezL.中央、コルディレラ、首都の各自治体部門の地区における、地下水井戸の微生物学的品質の測定。Mem。Inst。Investig。理科。健康2013; 11（1）：5-14。利用可能：scielo.iics。