セレンは、選択的液体培地です。サルモネラ属の腸内病原菌の存在が疑われるサンプルの濃縮のために、Leifsonによって設計されました。
この培地は、米国公衆衛生協会（APHA）の要件に準拠しているため、特に糞便、尿、液体または固形食品、水などのサンプル中のサルモネラ菌の存在の調査に受け入れられます。
セレナイトブロス。出典：著者MScが撮影した写真。マリエルサギル
その化学組成はこれらの微生物の回復を促進し、次に他の微生物の成長を阻害します。それは、腸内細菌科に属するほとんどの細菌に対して主に毒性があります。しかしながら、それは赤痢菌株の回復も可能にし、シュードモナスとプロテウスの成長を阻害しません。
それは無水亜セレン酸水素ナトリウム、無水リン酸ナトリウム、ペプトン、ラクトースで構成されています。シスチンが追加されたバリアントもあるため、その名前は亜セレン酸シスチンブロスです。
現在、亜セレン酸シスチンブロスの使用が好まれています。これは、より高い割合のサルモネラ回収が得られるためです。
基礎
ブロスに含まれるペプトンは、微生物の適切な発達のための栄養素として機能します。サルモネラ株は、窒素、ビタミン、アミノ酸の供給源としてペプトンを使用します。
ラクトースは発酵性炭水化物ですが、亜セレン酸ナトリウムはグラム陽性菌と腸内細菌叢に存在するほとんどの細菌、特に腸内細菌科の細菌の増殖を停止させる阻害物質です。リン酸ナトリウムは、培地のpHを安定させるバッファーです。
L-シスチンを含む亜セレン酸ブロス変異体の場合、この追加の化合物は亜セレン酸の毒性を最小限に抑え、サルモネラ菌の回復を高める還元剤です。
準備
-セレナイトブイヨン
あなたが混合物の成分を持っているなら、あなたは計量することができます：
無水亜セレン酸水素ナトリウム4g。
無水リン酸ナトリウム10g。
ペプトン5 g。
ラクトース4グラム。
化合物を1リットルの滅菌蒸留水に溶解します。少し加熱して完全に溶かします。
オートクレーブを使用してはならないため、一部の研究所では、培地を流動性蒸気に10分間曝して滅菌します。培地が滅菌されていれば、使用するまで冷蔵庫で保存できます。
また、非滅菌で調製し、10〜15 mlを滅菌試験管に直接入れることもできます。
この場合、休憩してすぐに使用する必要があります。培地は無菌ではないため、後で使用するために冷蔵庫に保存することはできません。
- 商業環境の準備
市販の培地が利用可能な場合は、脱水した培地23 gを量り、1リットルの滅菌蒸留水に溶解します。短時間加熱して溶解を終了します。オートクレーブしないでください。無菌的に滅菌試験管に10または15 mlを提供します。
培地の最終pHは7.0±0.2である必要があります。
脱水培地の色はベージュであり、調製物は明るく半透明の琥珀色であることに注意してください。
セレナイト-シスチンブロスバリアント
これには亜セレン酸ブロスと同じ化合物が含まれていますが、10 mgのシスチンが追加されています。残りの手順は、上記とまったく同じです。
用途
この培地は、疾患が急性期ではない場合、無症候性の患者または健康な保因者である場合に、疫学研究で使用するために特別です。
サルモネラ属の分離は、サンプルの汚染が少ないため、一般的に困難です。少量であるため、大量に見られる他の細菌属の増殖と簡単に重なります。
一方、加工食品の原材料は、多くの場合、熱、脱水工程、消毒剤の使用、放射線、防腐剤などにさらされます。
したがって、原材料に含まれるサルモネラ菌は、前述の工業プロセスに製品を供することによって誤処理されます。同様に、糞便などの臨床サンプルの場合、抗生物質で治療された患者に由来する株は弱いかもしれません。
したがって、サルモネラ菌の存在が疑われるサンプルは、ラクトースブロスであらかじめ濃縮し、その後亜セレン酸ブロスで濃縮して、SS寒天、キシロース寒天、リジンデオキシコール酸（XLD）などの選択培地での回収を最適化する必要があります。 ）、腸溶性ヘクトエン寒天培地（HE）、鮮やかな緑色寒天培地など。
播種
便サンプルの場合、サンプル1 gを取り、亜セレン酸ブロス10〜15 mlが入ったチューブに懸濁します。便が液体の場合は、1 mlを取り、培養液に懸濁します。直腸スワブの場合、スワブ材料をブロスに排出します。
固形食品サンプルでは1 grを取り、亜セレン酸ブロスに懸濁します。
流動食では、亜セレン酸ブロスと同じ濃度で2倍の濃度で混合します。
尿サンプルの場合、遠心分離し、上澄みを捨て、すべての沈殿物を取り、亜セレン酸ブロスに懸濁します。
ブロスを37℃で24時間インキュベートします。細菌の増殖は濁りによって証明されます。42°Cでのインキュベーションには、サンプルごとに追加のチューブを含めることもできます。続いて、亜セレン酸ブロスから選択的固形培地を播種します。
QA
無菌性を制御するために、未接種の各バッチからの亜セレン酸ブロスを37℃で24時間インキュベートします。媒体の濁りや変色がないことが期待されます。
以下のような既知の株を使用して、培地の適切な機能を制御できます。
Salmonella enteritidis ATCC 13076、Salmonella typhimurium ATCC 14028、Salmonella choleraesuis ATCC 12011、Escherichia coli ATCC 25922およびProteus mirabilis ATCC 43071。
期待される結果は次のとおりです。
- 最初の3つの菌株については、増殖が満足できるものでなければなりません。
- 大腸菌の部分阻害用。
- プロテウスの穏やかな成長のため。
制限事項
セレナイトブロス培地は人間の皮膚に有毒であるため、直接の接触は避けてください。
参考文献
- Flores-Abuxapqui J、Puc-Franco M、Heredia-Navarrete M、Vivas-Rosel M、Franco-Monsreal J.亜セレン酸ナトリウムと四チオン酸ナトリウムの培地の比較保菌者の糞便からのサルモネラ属菌の分離。Biomed 2003年改訂; 14（4）：215-220
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