組織化学的には、このような炭水化物、脂質およびタンパク質、とりわけ、化学染料として組織成分のその反応原理と種々の生物学的組織（植物および動物）の形態学の研究に有用なツールです。
この貴重なツールは、組織や細胞の構成や構造だけでなく、それらで発生するさまざまな反応を特定することもできます。同様に、微生物または他の病状の存在によって引き起こされる可能性のある組織の損傷を証明することができます。
組織化学的汚れ。ナイルウイルス、グラム陽性菌およびグラム陰性菌（Gram）、Histoplasma capsulatum（Grocott）、Mycobacterium tuberculosis（Ziehl Neelsen）。出典：Pixinio.com/Wikipedia.org/Nephron / CDC / Dr. ジョージ・P・クビサ
過去数世紀の組織化学は、ポール・エールリッヒによる血液脳関門の存在の実証などの重要な貢献を提供してきました。これは、エーリッヒが使用した実験動物の脳が、塩基性色素であるアニリンで染色されていなかったために可能でした。
これにより、さまざまな種類の細胞を染色するために、メチレンブルーやインドフェノールなどのさまざまな染料が使用されるようになりました。この発見は、それらの特異的な染色によると、細胞を好酸性、好塩基性および好中球に分類することにつながりました。
最近の研究では、この手法を適用して、月桂樹として知られているLitsea glaucescens種の組織における、フェノール、炭水化物、非構造脂質などのさまざまな化合物の存在を示しています。葉と木の両方でこれらを見つける。
同様に、Colares et al、2016は、組織化学的手法を使用して、Tarenaya hasslerianaの薬用植物を特定しました。この種では、デンプン、ミロシン、およびフェノール化合物と親油性化合物の存在が証明されました。
基礎
組織化学は、特定の色素との親和性のおかげで、組織に存在する細胞構造または分子の染色に基づいています。これらの構造または分子の元の形式での着色の反応は、後で光学顕微鏡または電子顕微鏡で視覚化されます。
染色の特異性は、細胞または組織分子に存在するイオン受容基の存在によるものです。
最後に、組織化学反応の目的は、染色を通してそれを示すことができるようにすることです。最大の生物学的構造から最小の組織および細胞まで。これは、染料が組織、細胞または細胞小器官の分子と化学的に反応するという事実のおかげで達成することができます。
検察
組織化学的反応は、組織の固定、包埋、切断などの技術を実施する前のステップを含む可能性があります。したがって、これらのステップでは、特定されるべき構造が損傷して、たとえ存在していても偽陰性の結果をもたらす可能性があることを考慮する必要があります。
これにもかかわらず、自己溶解や細胞破壊を防ぐため、組織の事前固定が適切に行われることが重要です。このために、ホルムアルデヒドやグルタルアルデヒドなどの有機溶媒を使用して化学反応が行われます。
生地を入れるのは、カットしたときの硬さを保ち、変形しないようにするためです。最後に、光学顕微鏡によるサンプルの研究のために、ミクロトームでカットが行われます。
さらに、組織化学的染色を進める前に、各バッチのテストに外部または内部の陽性コントロールを組み込むことをお勧めします。研究対象の構造に特定の染料を使用すること。
組織化学的汚れ
組織化学的手法の出現から現在まで、過ヨウ素酸シッフ（PAS）、グロコット、ジールニールセン、グラムなど、最も頻繁に使用される染色剤を含む、幅広い染色剤が使用されてきました。
同様に、他の染料は、とりわけ、インドのインク、オルセイン、マッソンの三色染料など、あまり使用されていません。
過ヨウ素酸シフ（PAS）
この着色により、グリコーゲンやムチンなどの炭水化物含有量の高い分子を観察できます。ただし、真菌や寄生虫などの微生物の同定にも役立ちます。皮膚や他の組織の特定の構造（基底膜）に加えて。
この染色の基礎は、染料が2つの隣接する水酸基間の炭素結合を酸化することです。これによりアルデヒド基が放出され、これがシッフ試薬によって検出され、紫色になります。
シッフ試薬は、塩基性フクシン、メタ重亜硫酸ナトリウム、塩酸で構成されています。これらの成分は、アルデヒド基が存在する場合、紫色に着色します。そうでなければ、無色の酸が生成されます。
着色の強さは、単糖に存在するヒドロキシル基の量に依存します。たとえば、真菌、基底膜、ムチン、グリコーゲンでは、色は赤から紫になり、核は青に染まります。
グロコット
これは、パラフィン包埋組織の真菌の同定において最も感度の高い染色の1つです。これにより、菌糸、胞子、内生胞子などのさまざまな真菌構造を識別できます。したがって、それは真菌症の診断のための日常的な染色と考えられています。
特に、それぞれニューモシスティス属およびアスペルギルス属のいくつかの真菌によって引き起こされるニューモシスト症およびアスペルギルス症などの肺真菌症の診断に使用されます。
この溶液は硝酸銀とクロム酸を含み、後者は固定剤と着色剤です。理論的根拠は、この酸が、真菌構造、例えば真菌の細胞壁に存在するムコ多糖によってヒドロキシル基のアルデヒドへの酸化をもたらすということです。
最後に、溶液中に存在する銀はアルデヒドによって酸化され、アルゲンタフィン反応と呼ばれる黒色に着色します。ライトグリーンなどのコントラスト染料も使用でき、真菌の構造はライトグリーンの背景で黒く観察されます。
ジール・ニールセン
この染色は、ノカルジア、レジオネラ、マイコバクテリウム属などの一部の微生物における、部分的または全体的な酸-アルコール耐性の存在に基づいています。
前述の微生物の細胞壁には色素の浸透を妨げる複雑な脂質が含まれているため、この染色の使用が推奨されます。特に気道からのサンプルで。
その中で、カーボルフクシン（基本着色剤）などの強力な着色剤が使用され、微生物が着色剤を保持でき、酸やアルコールで変色しないように熱が加えられます。最後に、メチレンブルー溶液を適用して、変色した構造を着色します。
赤に染色された構造では酸アルコール耐性の存在が観察され、退色に抵抗しない構造は青に染色されます。
グラムと墨
グラムは、とりわけ細菌や真菌感染症の診断に非常に有用な染色です。この染色は、グラム陽性微生物とグラム陰性微生物を区別することを可能にし、細胞壁の組成に存在する違いを明確に示します。
インドのインクは、多糖類（カプセル）を含む構造を対比するために使用される染色ですが。これは環が環境で形成され、クリプトコッカスネオフォルマンスで可能になるためです。
オルセイン
この染色により、様々な細胞の弾性線維と染色体が着色され、後者の成熟過程の評価が可能になります。このため、細胞遺伝学的研究で非常に有用です。
これは、多種多様な細胞の核に存在するDNAなどの分子の負電荷による色素の取り込みに基づいています。したがって、これらは青から濃い紫に染色されます。
マッソンの三色
この染色は、メラニン色素を含むいくつかの微生物または材料を識別するために使用されます。これは、真菌症の場合であり、真っ白な真菌、褐色皮膚真菌症、および黒色穀物の真菌症によって引き起こされます。
最終的な考え
近年、組織化学が関与しているが他の基礎や原理に関連している新しい診断技術の作成には多くの進歩がありました。これらの手法には、免疫組織化学や酵素組織化学の場合とは異なる目的があります。
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