SIM培地は、特別にいくつかの細菌、特に腸内細菌を同定するのを助けるために設計された、半固体及び差動寒天です。トリプテイン、ペプトン、硫酸鉄、硫酸アンモニウム、チオ硫酸ナトリウム、寒天で構成されています。
この媒体により、硫化水素（H 2 S）の生成、インドールおよび運動性の形成、したがって頭字語SIM の3つの重要なテストを実行できます。その優れた有用性のため、細菌学研究室には欠かせません。
A.市販のSIMメディアB. SIM H2S（-）、インドール（-）、運動性（+）テストおよびSIM H2S（+）、インドール（-）、運動性（+）テスト。出典：A.著者MScが撮影した写真。マリエルサ・ギル・B・ムフロアイザ
他の培地とは異なり、一部のバクテリアの移動能力を検出するためには、それは半固体でなければなりません。この意味で、このテストは腸内細菌科では非常にうまく機能しますが、ハンギングドロップなどの他の方法が好まれる非発酵グラム陰性桿菌では機能しません。
SIM培地は、他の細菌との関連で一部の細菌を特徴付ける特定の特定の特性を区別することを可能にします。たとえば、プロテウスミラビリスはH 2 S（+）、インドール（-）、運動性（+）ですが、大腸菌はH 2 S（-）、インドール（+）および運動性（+）であることで区別されます。
基礎
硫化水素を生産できる微生物とそうでない微生物を区別して使用するため、差別的と見なされるのは培地です。また、トリプトファンからインドールを形成するものとそうでないものを強調し、最終的に運動性細菌と不動性細菌を区別します。
電源
他の培地と同様に、非必要な微生物が発生するために必要な栄養素を提供する要素があります。これらの要素はペプトンとトリプテインによって表されます。
培地中の微生物の発生は、この培地が評価する特性の有無を観察できるようにするために不可欠です。
硫化水素の製造
頭字語SIMの文字Sは、硫化水素（H 2 S）の生成を示します。硫化水素を形成できる細菌は、チオ硫酸ナトリウムから硫黄を吸収します。
H 2 S-無色のガス-が形成されると、それは媒体中に存在する鉄塩と反応して、硫化鉄を形成し、はっきりと見えます（黒い沈殿物）。H 2 Sを形成しない細菌は、元の色（ベージュ）の培地を残します。
黒い沈殿物の存在は、運動性の解釈を妨げる可能性があります。ただし、ほとんどのH 2 S 産生腸内細菌科は、サルモネラ菌、プロテウス菌、シトロバクター菌などの積極的に運動性があることが知られています。さらに、培地全体を覆う黒い沈殿物は、正の運動性を示唆しています。
インドール形成
頭字語SIMの2番目の文字は「I」であり、インドールの形成を表します。
この意味で、トリプテインは、栄養素の供給源であることに加えて、別の基本的な機能を果たします。このペプトンは、トリプトファンと呼ばれるアミノ酸が豊富であるため、トリプトファナーゼを産生する細菌を示すことができます。
この酵素は、アミノ酸トリプトファンの切断に関与し、インドール（無色の物質）、ピルビン酸、およびアンモニウムを形成します。
そのため、この反応を示すためには、顕現物質（エーリッヒ試薬またはコバック試薬）を加える必要があります。どちらもインドールと反応し、寒天の表面に赤いフクシアのリング状の物質を形成します。フクシアリングが表示される場合、インドールテストは陽性と解釈されます。
この酵素を持たないバクテリアはリングを形成せず、インドールテストで陰性と解釈されます。
試薬を追加すると培地が濁り、運動性を視覚化することが困難になるため、インドールテストを最後に解釈する必要があることに注意してください。
運動性
最後に、SIMという単語の「M」は運動性を意味します。運動性を評価するために、この培地は戦略的に半固体です。この特徴は、細菌の動きがあるかどうかを観察できるようにするために不可欠です。べん毛を持っているバクテリアは、この陽性テストを与えるバクテリアです。
最初の接種材料とその周辺の両方で濁りが観察された場合、陽性のテストは明白です。一方、非運動性細菌は最初の接種経路でのみ発生します。
準備
中型SIM
脱水した培地30 gを計量し、1リットルの蒸留水に溶解します。混合物を5分間放置し、完全に溶解するまで頻繁に攪拌しながら加熱して沸騰させる。
綿のキャップとオートクレーブ付きの試験管に混合物を121°Cで15分間分散させます。オートクレーブからチューブラックを取り外し、垂直位置で固化させて、培地がブロックの形状になるようにします。
保存のため、使用するまで冷蔵庫に保管します。調製した培地の最終pHは7.3±0.2でなければなりません。
培地を接種するときは、室温である必要があります。ミドルカラーはベージュです。
コバックの試薬
アミルまたはイソアミルまたはブチルアルコール150 mlを測定します。（上記の3つのうちの1つを使用してください）。
p-ジメチルアミノベンズアルデヒド10 gを溶解します。次に、濃塩酸50 mlをゆっくりと加えます。
すぐに使用できる試薬は無色または淡黄色です。琥珀色のボトルに入れて冷蔵庫に保管します。焦げ茶色になったら使用しないでください。破損していることを示しています。腸内細菌科に関しては、この試薬が好ましい。
エーリッヒ試薬
2 gのp-ジメチルアミノベンズアルデヒドを量り取り、190 mlの無水エチルアルコールに溶解し、40 mlの濃塩酸とゆっくり混合します。コバックの試薬と同じ方法で保管してください。エールリッヒの試薬は、非発酵性および嫌気性細菌に最も使用されます。
用途
SIM培地は細菌学研究室で非常に使用されています。その利点は、腸内細菌科の同定において、3つの重要な特性を同じチューブで観察できることです。
播種
この培地を播種する正しい方法は、針を使用することです。針を使用して、調査する純粋なコロニーの一部を採取し、培地の中心に垂直に挿入します。シングルランジを実行する必要があります。パンクはチューブの底に達してはいけません。正しいのは、深さの3分の2だけをカバーすることです。
正の運動性の誤った解釈につながる可能性があるため、接種材料を繰り返すことはお勧めしません。接種された培地は、37℃で24時間好気的に培養されます。
時間が終了したら、H 2 Sの生成があったかどうかを観察し、運動性を読み取ります。最後にインドールが明らかになり、EhrlichまたはKovacの試薬を3〜4滴加え、穏やかに混合して解釈します。
出典：Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W（2004）。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。
QA
無菌管理として、1本または2本のチューブを接種せずに37℃のオーブンで24時間インキュベートします。この時間以降、成長や色の変化はないと予想されます。
品質管理として、Escherichia coli ATCC 25922、Enterobacter aerogenes ATCC 13048、Klebsiella pneumoniae ATCC 13883、Salmonella typhimurium ATCC 14028、Shigella sonnei ATCC 29930、Proteus vulgaris ATCC 13315などの既知の認定株を使用できます。
予想される結果は次のとおりです。Escherichiacoli H 2 S陰性、インドールおよび陽性運動性、Enterobacter aerogenesのみ陽性運動性、Salmonella typhimurium H 2 Sおよび陽性運動性、陰性インドール。尋常性プロテアはすべて陽性であるが、肺炎桿菌および赤痢菌はすべて陰性である。
制限事項
-Morganella morganiiの一部の株は、他の株の中でも、メラニンの生成により、この培地で茶色っぽい色素を生成することがあります。これは硫化第一鉄の沈殿と混同しないでください。経験の浅い専門家では、この状況はH 2 S テストの解釈に偽陽性を生成する可能性があります。
-厳密な好気性細菌はチューブの表面でのみ増殖し、運動性の解釈を困難にします。
参考文献
- BD Laboratories。BBL SIMミディアム。2008.利用可能：bd.com
- Neogen Laboratories。SIM中。で利用可能：食品安全
- ディフコフランシスコソリアメルギゾ。SIM中。2009.利用可能：http://f-soria.es
- ブリズエラ研究所。中程度のSIM。で利用可能：.brizuela-lab.com
- ブリタニア研究所。中程度のSIM。2015.次で入手可能：studyres.es/doc
- Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W（2004）。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。