媒体スチュアートは、生物学的サンプルの輸送に使用される栄養素なしで半固体寒天またはブロスです。その目的は、サンプルに存在する菌株を一定期間生存できるようにすることですが、微生物の個体数を増やすことはありません。
1948年にモフェット、ヤング、スチュアートが作成し、後にトーシャクとパツラによって修正されました。グリセロリン酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、塩化カルシウム、寒天で構成されています。後者は半固体培地に存在し、液体には存在しません。一部の実験室はそれにメチレンブルーを追加します。
スチュアート輸送を備えたカルチャット。出典：作成者：CDC / Dr. Gilda Jones、礼儀：公衆衛生画像ライブラリ
通常、すぐにサンプルを播種できない場合に使用します。この場合、サンプルは輸送培地に入れられ、培養を行う実験室に送られます。
このようにして、存在する微生物が、対応する培地に接種されるまで生き続けることが保証されます。
当初、その使用は、淋菌の存在が疑われる尿道または膣のサンプルを輸送することを目的としていました。後に、彼らはその有用性がより広い可能性があることに気づきました。
スチュアート培地は、とりわけ、髄膜炎菌、インフルエンザ菌、化膿連鎖球菌、肺炎球菌、コリネバクテリウムジフテリア、百日咳菌などの不安定で扱いにくい微生物の保存に非常に効率的であることがわかりました。腸内細菌などの他の迷惑な微生物に加えて。
スチュアート培地は基本的にサンプルの乾燥を防ぎ、浸透圧のバランスを維持し、微生物を理想的なpHに保ちます。一方、戦略的にこの培地は栄養素を含まないため、微生物の繁殖を防ぎます。
市場には、カルチャーと呼ばれるこれまたは他の輸送手段を含む特別なサンプル輸送装置があります。それらはまた実験室で準備することができます。
基礎
スチュアート輸送モードの目的は、処理されるまでサンプルを元の状態に近づけることです。
グリセロリン酸ナトリウムと塩化カルシウムは、pHと浸透圧を維持することによって機能するバッファーシステムです。
一方、チオグリコール酸ナトリウムは還元剤として作用し、寒天を含む場合は半固体のコンシステンシーを与え、培地の酸素化を遅らせます。最後に、メチレンブルーは酸化インジケーターです。つまり、酸素の存在を検出します。
レドックスインジケーター付きの半固体培地は、嫌気性細菌の存在が疑われるサンプルの輸送に最適です。
輸送手段の特徴
スチュアート媒体は、すべての輸送手段と同様に、次のような特定の特性を満たしています。
-増殖することなく存在する生存可能な微生物株を維持します。
-栄養素を含みません。その化合物は、適切なpHおよび浸透圧条件下でサンプルを水和状態に保つことを目的としています。
-ニューモコッカスなどのいくつかのデリケートな微生物の自己分解物を阻害します。
-その使用は一時的なものであり、長すぎないようにする必要があります。
準備
レドックスインジケーター付き半固体スチュアートミディアム
家の準備
材料
グリセロリン酸ナトリウム10 gr
チオグリコール酸ナトリウム1.0 gr
塩化カルシウム0.1 gr
メチレンブルー0.002 gr
寒天3 gr
蒸留水1 L
成分を混合し、完全に溶解するまで加熱します。チューブまたは特殊な綿棒に注ぎます。それらをオートクレーブに入れ、121℃で15分間滅菌する。（ブロックの形で）垂直位置でチューブを冷まします。室温で保管してください。
市販培地での準備
1リットルの蒸留水に14.1グラムの培地を量ります。完全に溶解するまで頻繁に振とうし、沸騰させます。すでに説明したように、残りの手順。
脱水後の培地はクリーム色で、表面は青色になっています。これはメチレンブルーの存在によるものです。
培地のpHは7.4±0.2に調整する必要があります
液体改質スチュアートミディアム（自家製）
材料
グリセロリン酸ナトリウム10 gr
チオグリコール酸ナトリウム1 gr
塩化カルシウム二水和物0.1 gr
蒸留水1000 ml
半固体と同じ成分を含みますが、寒天やメチレンブルーは含まれていません。この場合、成分は加熱せずに混合され、0.5 mlはスクリューキャップ付きの16 x 125 mmチューブに分配されます。
121°Cのオートクレーブで10分間滅菌します。サンプリングには、サンプルがPCRの場合はダクロン綿棒を、培養の場合はレーヨンを使用する必要があります。
チューブは室温で保存されます。
用途
商業的には、culturetteと呼ばれる特別なサンプル輸送装置があります。このデバイスは細長いチューブで、内部に綿棒があり、最後に半固体または液体のスチュアート培地を含むセグメントがあります。
デバイスを開き、綿棒でサンプルを採取します。次に、綿棒の先端が半固体の輸送媒体に挿入されるまで、チューブに戻されます。中には、液体のスチュアート媒体を含浸させたポリウレタンスポンジが用意されており、湿らせておくとサンプルが保存されます。
繊細な微生物の存在が疑われる場合は、木炭と綿棒を使用してサンプルを収集する必要があります。
スワブまたはスワブで採取してこの培地に移すことができるサンプルは、咽頭滲出液、直腸スワブ、および膣、尿道、創傷、眼、耳、膿瘍などのさまざまな分泌物です。
輸送媒体中のサンプルを実験室に移す間、媒体を極端な環境条件（冷たすぎるか、または熱すぎる）にさらさないようにする必要があります。大気圧の急激な変化も避ける必要があります。
培地が微生物を生存可能に保つことができる時間は、問題の株に依存します。たとえば、Neisserias属およびHaemophilus属の微生物の場合、最大24時間生存可能ですが、サルモネラ菌や赤痢菌などの菌株は数日から数週間も存続します。
サンプルの処理に4日以上かかると推定される場合は、サンプルを-70°Cで凍結することが推奨されます。
輸送手段でのサンプルの識別
準備された輸送手段または商用カルチャーには、以下の情報が配置されるラベルが必要です。
患者の姓名：サンプルの混乱を回避します。
識別番号：注文を作業し続けるのに便利です。
サンプル収集源：細菌学者が適切な培地を選択するのに役立ちます。
担当医：診察が必要な場合があります。
サンプル収集の日付と時間：サンプルの収集から実験室での受付までの経過時間に応じて、サンプルの受け入れまたは拒否が必要です。
添付すると非常に役立つ他の情報は次のとおりです。
推定診断：疑わしい診断に従って、特別な培地の追加をガイドします。
抗生物質による治療：抗生物質図に添付することは有用です。
この情報はすべて、適切なサンプル処理を確実にするために不可欠です。
QA
スチュアート培地の性能を評価するために、次のような既知の株を接種して25°Cで維持できます：Bordetella pertussis ATCC 9340、Haemophilus influenzae ATCC 19418、Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424、Neisseria meningitidis ATCC 13090、Streptococcus pneumoniae ATCC 6301。
すべての場合において、問題の微生物を回収し、24時間保存することが期待されます。
一方、他の菌株としては、Shigella flexneri ATCC 12022、Staphylococcus aureus ATCC 6538、Streptococcus pyogenes ATCC 12344、Enterococcus faecalis ATCC 33186、Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853およびEscherichia coli ATCC 11775を使用できます。
いずれの場合も、最大96時間で十分な回復が見込まれます。
制限事項
一部の研究では、スチュアート培地に存在するグリセロホスフェートが、他のグラム陰性菌の中でも、いくつかの大腸菌群によって代謝され、この培地で増殖することが保証されています。
このリスクは、サンプル処理が遅れるほど長くなります。同様に、輸送中にスチュアート媒体を高温にさらすことも影響します。
参考文献
- 「輸送手段（微生物学）」ウィキペディア、フリー百科事典。2018年4月13日、10：36 UTC。2019年4月1日、次の場所で入手可能：es.wikipedia.org
- Microkit Laboratories：カルチャーメディア。スチュアート交通。で入手可能：Medioscultivo.comで入手可能
- LabLisan。スチュアートの交通手段。lablinsan.clで入手可能
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- Metrix Laboratories。スチュアート。2017.入手可能：metrixlab.mx
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