比濁分析は、入射放射線の方向に対してある角度で(溶液または懸濁液中)粒子による放射の測定および散乱放射線の電力を測定することを含みます。
浮遊粒子が光線に当たると、光の一部が反射され、別の部分が吸収され、別の部分が偏向され、残りが透過します。これが、固体粒子の懸濁液がある透明な媒体に光が当たると、懸濁液が曇っているように見える理由です。
比濁分析とは何ですか?
溶液中の粒子による放射線の分散
光ビームが浮遊物質の粒子に当たった瞬間に、ビームの伝搬方向が方向を変えます。この効果は以下に依存します。
1.粒子の寸法(サイズと形状)。
2.懸濁液の特性(濃度)。
3.光の波長と強度。
4.入射光距離。
5.検出の角度。
6.媒体の屈折率。
比濁計
比濁計は、液体サンプルまたは気体中の浮遊粒子を測定するために使用される機器です。したがって、光源に対して90度の角度で配置されたフォトセルは、懸濁液に存在する粒子からの放射線を検出します。
同様に、フォトセルに向かって粒子によって反射される光は、粒子の密度に依存します。図1は、比濁計を構成する基本的なコンポーネントを示しています。
図1.比濁計の基本コンポーネント。
に。
比濁法では、高い光出力を備えた放射線源を持つことが非常に重要です。キセノンランプや水銀灯、タングステンハロゲンランプ、レーザー光線など、さまざまな種類があります。
B.
このシステムは、放射線源とキュベットの間に配置されているため、このようにして、所望の放射線と比較して異なる波長の放射線がキュベット上で回避される。
さもなければ、溶液中の蛍光反応または加熱効果が測定の偏差を引き起こすでしょう。
C.
それは一般に角柱または円筒形の容器であり、さまざまなサイズを持つことができます。これは検討中のソリューションです。
D.
検出器は特定の距離(通常はキュベットに非常に近い)に配置され、懸濁液中の粒子によって散乱された放射線の検出を担当します。
そして。
一般に、データを受信、変換、処理するのは電子機器であり、この場合、実行された調査から得られた測定値です。
偏差
すべての測定は、主に以下によって与えられるエラーのパーセンテージの影響を受けます。
汚染された細胞:細胞内、研究対象の溶液の外部にある薬剤は、細胞の内部または外部にかかわらず、検出器に向かう途中の放射光を減少させます(欠陥のある細胞、細胞壁に付着したほこり)。
干渉:微生物汚染または濁りの存在により、放射エネルギーが分散され、分散の強度が増加します。
蛍光化合物:これらは、入射放射線によって励起されると、誤った高い散乱密度の読み取りを引き起こす化合物です。
試薬の保管:システム温度が不適切な場合、試験条件が悪くなり、試薬が濁ったり沈殿したりする可能性があります。
電力の変動:入射放射線がエラーの原因となるのを防ぐため、均一な放射線には電圧安定装置をお勧めします。
計量特性
検出された放射線の放射力は粒子の質量濃度に正比例するため、比濁分析の研究は、理論的には、他の同様の方法(濁度測定など)よりも高い計測感度を備えています。
さらに、この手法では希釈溶液が必要です。これにより、吸収現象と反射現象の両方を最小限に抑えることができます。
用途
比濁分析研究は、臨床検査室において非常に重要な位置を占めています。用途は、免疫グロブリンおよび急性期タンパク質、補体および凝固の測定に及びます。
免疫複合体の検出
生物学的サンプルに目的の抗原が含まれている場合、それは(緩衝液中で)抗体と混合されて免疫複合体を形成します。
比濁法は、抗原抗体反応(Ag-Ac)によって散乱される光の量を測定し、このようにして免疫複合体が検出されます。
この調査は、次の2つの方法で実行できます。
エンドポイント比濁法:
この手法はエンドポイント分析に使用でき、研究対象の生体サンプルの抗体を24時間インキュベートします。
Ag-Ac錯体は比濁計を使用して測定され、散乱光の量は、錯体が形成される前に実行された同じ測定と比較されます。
キネティックネフロメトリー
この方法では、複合体形成の速度が継続的に監視されます。反応速度は、サンプル中の抗原の濃度に依存します。ここでは、測定は時間の関数として行われるため、最初の測定は時間「ゼロ」(t = 0)で行われます。
研究は、エンドポイント法の長時間と比較して1時間で実行できるため、キネティック比濁法は最も広く使用されている手法です。試薬添加直後の分散比を測定します。
したがって、試薬が一定である限り、存在する抗原の量は変化率に正比例すると見なされます。
他のアプリ
比濁分析は、一般に、水化学的品質分析で使用され、透明度を決定し、その処理プロセスを制御します。
また、大気汚染の測定にも使用されます。この場合、粒子の濃度は、入射光で生成される分散から決定されます。
参考文献
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