コンゴーレッドは、ジアゾニウム塩と活性芳香族環を結合することによって形成されたタンパク質のアゾ染料です。この物質は、可視スペクトルの電磁放射を吸収することができるため、色が濃くなります。
負に帯電しています。したがって、特定のタンパク質物質などの正に帯電した細胞成分に対して親和性があります。その色はpHによって異なります。この意味で、媒体が酸性（pH3未満）の場合、色は濃い青色になります。pH3-pH 5.2の間はフクシア（ターニングゾーン）であり、> pH 5.2の場合、色は濃い赤になります。
脱水コンゴレッドおよびコンゴレッドコロイド溶液。出典：Pixinio.comおよびWikipedia.com
複数の用途があるため、非常に用途の広い物質です。繊維産業の着色剤として、またセルやファブリックにも使用されています。
また、分光光度計の適切な機能の評価、バイオフィルム形成の研究、またはアミロイドの診断において、pHインジケーターとして、対照物質として酵素作用を測定する培地を作成します。
同様に、壁の特定の構造（リポ多糖）を特定することで、細菌と真菌の血清型を区別することができます。
コンゴレッドの特徴
この物質は1884年にBöttigerによって発見されました。これは、ベンジジンのビス-ジアゾ酸とナフチオン酸によって形成されたジアゾニウム誘導体です。コンゴレッドの分子量は21アームストロングで、分子量は約8000 g / molです。
コンゴレッドは水に溶けること、さらにはエタノールなどの有機溶媒に溶けてコロイド溶液を形成することを特徴としています。
セルロース、アミロイド組織、正に帯電した細胞成分に対して親和性があります。
準備
コンゴレッドは、使用する技術に応じて異なる濃度で調製されます。ほとんどの人がコンゴレッドを1％、2％、0.1％などで使用しています。
たとえば、2％コンゴレッドを調製するには、2 gの乾燥食品着色料を量り取り、100 mlの蒸留水を加えます。その後、こはく色のボトルに入れられます。
用途
繊維産業の着色剤として
しばらくは綿に固定されているため繊維産業で広く使用されていましたが、発ガン性があるため、また色が安定せず、摩擦により変色するため、現在は使用されていません。
バイオフィルム形成能力の決定
微生物のバイオフィルム形成能力は、毒性因子であることが示されています。
この意味で、コンゴレッド染料はバイオフィルム形成を決定する方法として使用されます。コンゴレッドは、バイオフィルムに存在する細胞外多糖に結合します。ただし、他の方法と比較して、発生する偽陰性が高いため、これは最も推奨されません。
この方法では、コンゴレッドアガーを使用します。これは、ベースとなる血液寒天、グルコース（10 g / l）、およびコンゴレッド色素（0.4 g / l）で構成されています。評価される株を培地に播種し、37℃で24時間インキュベートし、その後室温で48時間インキュベートします。
黒色の結晶性コロニーと乾燥した外観が観察された場合、陽性の検査が示されます。
分光光度計の品質管理
吸光度またはトランザクション測定機器が国際規制によって確立された測光パラメーターに準拠しているかどうかを評価するには、簡単な手法を使用して、機器が許容範囲内の結果を放出するかどうかを確認できます。
評価手法の1つは、等吸収点に基づくコンゴレッドの使用です。
等吸収点は、コンゴレッドがpH、濃度、温度に関係なく同じ吸光度を放出する波長です。吸光度の値は固定されており、参照として使用できます。
コンゴレッドの理論上の等吸収点は541 nmであることが知られています。得られた値が異なる場合は、装置に波長ドリフトの問題があることがわかっているため、専門の技術者による確認が必要です。
培地の調製
Ortiz et al。セルライト微生物株を検出するために、コンゴレッド染料とCMC寒天と呼ばれるカルボキシメチルセルロースで調製された培地について説明します。つまり、セルラーゼ生産者（エンドグルコネーゼ、エキソグルカナーゼ、β-グルコシダーゼ）です。
この媒体は強い色合いを持っています。色は、カルボキシメチルセルロースの構造を破壊するエンドグルカナーゼ酵素の作用により消散します。これは肯定的な反応を示唆しています。
粘度と吸光度の低下により、酵素活性を定量化できます。たとえば、Streptomyces sp。
微生物の同定
コンゴレッドは特定の菌株の多糖構造に親和性があるため、これらの微生物の同定が可能です。その中には、Escherichia coliとShigella flexneriがあります。
Azospirillum spの場合と同様に、コンゴレッド寒天プレートも特徴的なコロニーを取得するために使用されます。
細胞および組織の染色
コンゴレッドの最も一般的な用途の1つは、アミロイドーシスの診断におけるその有用性です。この奇妙な病気は、さまざまな臓器における異常なタンパク質の細胞外蓄積から成ります。この異常なタンパク質は骨髄で作られ、アミロイドと呼ばれています。
コンゴレッドはこの物質に対して高い親和性を持っています。この特性は、組織学的組織切片におけるその存在を示すために使用されています。コンゴレッドは、この目的でヘマトキシリン/エオシンと組み合わせて使用されます。
アミロイド組織とコンゴレッドの結合は、カルボキシル基とアミノ基の間の非極性水素結合を介して発生します。アミロイドタンパク質はカルボキシル基（COOH）を提供し、コンゴはアミノ基を提供します。
アミロイド組織は、光学顕微鏡で見ると、ピンクから濃い赤までさまざまな色合いで着色されています。二重偏光の顕微鏡では、これらの標本はアップルグリーンの特徴的な複屈折で観察されます。
つまり、アミロイド線維は異方性であるため、二色性を示します。この観察は診断を確認します。
コンゴレッドによる組織染色は、免疫細胞化学的方法などの他の診断方法と互換性があり、色を変更することもできます。
pHインジケーターとして
pHの変化に逆らう特性は、クロモエンドスコピーと呼ばれる手法で使用されます。
この技術は、特定の病状の検出を可能にする着色剤とpHインジケーターを使用します。その中には、酸性のマーカーとして使用されている、胃粘膜の早期癌病巣を明らかにすることができるコンゴレッドの使用があります。
この技法は、酸性pHのコンゴレッドが黒色であるという事実に基づいています。したがって、コンゴレッドの溶液を胃粘膜に置いた後、青みのある領域を選択して生検のサンプルを採取します。つまり、酸の生成がない領域です。これは、がん性の病巣の存在または壁細胞の喪失を示唆しています。
参考文献
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