寒天BIGGYは固体培地の選択と差動文化です。これは、主要なカンジダ種の分離と識別を支援するために設計されました。その名前BIGGYは、英語のビスマスグルコースグリシンイーストの頭字語に由来します。
オリジナルのフォーミュラはニッカーソンによって作成されたため、この培地はニッカーソン寒天としても知られています。現在、酵母エキス、グリシン、デキストロース、クエン酸アンモニウム、クエン酸ビスマス、亜硫酸ナトリウム、寒天で構成されています。
BIGGY寒天のグラフィック表現。出典：Flickr.com
BIGGY寒天は、コンプレックスC.アルビカンス、C。トロピカリス、C。クルセイ、C。ケフィアなどの種を区別するために配合されていますが、カンジダグラブラタ、C。パラプシローシス、C。ギリエルモンディ、トリコスポラン種、ジオトリクムカンディダムなど、他の種も成長しますそしてSaccharomyces cerevisiae。
感度と特異性は優れていますが、同様の機能を持つ他のメディアと比較すると、CHROMagarを上回って2位にあります。このため、はるかに高価ですが、多くのラボでは後者を好みます。
BIGGY寒天や他の同様の手段を使用すると、推定をすばやく特定できるが、確認できないことは明らかです。したがって、追加の識別方法を使用できる必要があります。たとえば、Vitek 32およびAPI 20識別システム。
基礎
BiGGY寒天培地は、酵母、特にカンジダ属の酵母を分離するための部分的に選択的な培地と考えられていますが、他の属でも成長することがあります。
含まれる種に応じて、外観、色、形、サイズの点で異なる特性が観察されるため、これも微分媒質です。コロニーの色が異なるため、発色培地と見なされます。
酵母コロニーの色は、寒天中の亜硫酸ビスマスの存在によるものです。ニッカソンは、カンジダ属の酵母が亜硫酸ビスマスの細胞外還元を行い、硫化ビスマス（不溶性の黒い物質）に変換することを認識しました。これにより、淡褐色から黒色のコロニーになります。
この寒天は、酵母エキスとデキストロースを含んでおり、酵母の発生に基本的な栄養素とエネルギーの源を提供します。グリシンは酵母の成長刺激剤ですが、特定の細菌の成長を阻害します。
これと同じ意味で、クエン酸アンモニウムとクエン酸ビスマス、および亜硫酸ナトリウムは、細菌の増殖を阻害します。寒天は中程度の固さを与える薬剤です。
準備
脱水した培地45gを量り取り、1リットルの蒸留水に溶かします。混合物を振って加熱し、完全に溶解するまで1分間煮沸します。この培養液はオートクレーブできません。
水浴で約45℃に冷却したら、滅菌ペトリ皿に20 mlを注ぎます。
脱水後の媒体の色は黄灰色で、黄白色のゲルが調製され、わずかな凝集沈殿が観察されます。
pHは6.8±0.2です。
準備した培地は、冷蔵庫（4℃）で保管し、光から保護する必要があります。オートクレーブできない培地ですので、なるべく早くご使用ください。使用後3日までにご使用ください。
使用する
プレートを室温（25°C）で24、48、72時間インキュベートします。インキュベーション時間は5日間まで延長できます。
カンジダの各種は、それらを互いに区別させる特定の特性を発達させます。培地の製造者は、各種について次の特徴を説明しています：
-Candida albicans複合体：この寒天上で、わずかな菌糸状の境界を持つ、滑らかな、丸い、茶色または黒いコロニーとして成長します。暗い色が中央に拡散しないことを除いて。
-Candida tropicalis：中心が黒く、菌糸の境界がわずかにある、明るく小さく暗い茶色のコロニー。暗い色は中央に向かって拡散します。これは、72時間インキュベートした後、この種の典型的な特徴です。
-Candida kruseiは、茶色から黒っぽい境界線を持つ、大きくて平らで荒く見えるコロニーを発達させます。
-Candida parakrusei：中型のコロニー。ほとんどの場合、荒く、平らです。色は明るい濃い赤褐色から明るい赤褐色まで変化します。コロニーの境界は、広範で黄色がかった菌糸体です。
-Candida stellatoidea：中程度の平らなコロニー、暗褐色、ほとんど黒色を発達させます。菌糸体の発達は非常に乏しいです。
YücesoyとMarolが2003年に実施した研究では、CHROMagar培地がBIGGY寒天よりも異なるカンジダ種の識別と識別に優れた感度と特異性を持っていることが示されました。
QA
無菌制御のために、接種されていないプレートを25℃で暗所で24〜48時間インキュベートし、いかなる種類の成長も色の変化もないと予想されます。
培地の品質管理に推奨されるATCC株は次のとおりです。
Candida albicans ATCC 60193複合体、Candida glabrata ATCC 2001、Candida krusei ATCC34135。これらすべてにおいて、上記のように成長が予想されます。
以下の菌株も使用できます：
Escherichia coli ATCC 25922、Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853およびStaphylococcus epidermidis ATCC12228。最初の2つでは完全な阻害が予想されますが、部分的に成長している場合、コロニーはクリーム色になります。
黄色ブドウ球菌の場合、完全に阻害されると予想されますが、部分的に増殖するとコロニーが白色になります。
制限事項
一部のバクテリアはこの培地で増殖することができ、カンジダのコロニーを模倣して色が暗くなることさえありますが、コロニーを塗抹して顕微鏡で観察すると、簡単に廃棄されます。
表：ユセソイMとマロルSの研究によるBIGGY寒天上のいくつかの酵母のコロニーの特徴
出典：YücesoyM、Marol S.酵母種の同定のためのCHROMAGARカンジダおよびBIGGY寒天のパフォーマンス。Ann Clin Microbiol Antimicrob。2003; 2（8）：1-7
参考文献
- YücesoyM、MarolS。酵母種の同定のためのCHROMAGARカンジダおよびBIGGY寒天の性能。Ann Clin Microbiol Antimicrob。2003; 2（8）：1-7。
- MCD LAB。テクニカルデータシートBIGGY寒天。入手可能：mcdlab.net/
- ラボネオゲン。巨大寒天。で利用可能：foodsafety.neogen.com
- Conda Pronadisa Laboratories。巨大な寒天。利用可能：condalab.com
- BD Laboratories。BD BiGGY寒天（ビスマスグルコースグリシンイースト寒天）。2011.利用可能：bd.com