細菌学的ループ：特性、種類、用途 - 生物学 - 2024

細菌ループは、微生物培養物（細菌または真菌）の播種のために微生物学者によって使用される作業器具です。それはおそらくこれらの専門家によって最も使用されている楽器です。

使い方は簡単に見えますが、実際には多くのトレーニングが必要です。播種を開始する前に、ブンゼンバーナーでループを滅菌してから、液体培養または固体培養に由来する可能性のある微生物の接種材料を採取します。

細菌ループの種類。出典：機械可読の著者は提供されていません。ばやおと推定（著作権の主張に基づく）。

接種物を採取したら、液体培地に入れたり、固体培地に播種したりできます。各手順の後、ループは再度滅菌されます。ハンドルは、スライド上に微生物の塗抹標本を作るのにも適しています。

細菌ループには、プラチナループまたはループ、接種ループまたはシードループなど、多くの名前がありますが、実際の名前はコールループです。

ハンドルの素材は、一般的にニッケルクロム（ニクロム）合金またはプラチナです。市場で入手可能なもう1つの種類は、プラスチック製の使い捨て細菌ループです。

一方、細菌ループにはいくつかのタイプがあり、それぞれが微生物学者によって実行されるタスク内で機能を果たします。ハンドルの選択は、何を実行する必要があるかによって異なります。

たとえば、微生物を分離するために消耗によって線条体を実行するには、キャリブレーションされているかどうかに関係なく、閉じたリングで終わるプラチナループが使用されます。

一方、尿サンプルを播種する場合は、CFUを定量化することが重要ですが、キャリブレーションされたループを使用する必要があります。同様に、穿刺によって播種する必要がある生化学的検査を接種するには、針ループが不可欠です。ハンドルは訓練を受けた担当者が取り扱うことが重要です。

特徴

細菌学的ループは、2つの極端な要素で構成されています。一方の端はハンドルまたはベースに対応し、もう一方の端はハンドル自体です。

ハンドルベースまたはハンドル

ベースは、取り扱い中にハンドルをつかむのに役立ちます。通常は金属製ですが、ハンドルの先端をライターで消毒すると、作業者が火傷しないように断熱材が付いています。長さは長くなりますが、約20 cmです。ハンドルを調整するためのスレッドがあります。

扱う

それは機能的な終わりです。つまり、微生物や培地と接触する部分です。それは、ベースに挿入される細いワイヤーで構成されています。

ハンドルはニクロムまたはプラチナで作成できるため、プラチナハンドルと呼ばれることもあります。長さは約6.5 cmで、ゲージは約0.20 mmです。ハンドル付きのハンドルは、26.5 cmを測定できます。測定値はメーカーによって異なる場合があります。

タイプ

細菌ループにはいくつかのタイプがあり、それぞれに特定の用途があります。ハンドルのタイプは次のとおりです：キャリブレーションされたリング型ハンドル、キャリブレートされていないリング型ハンドル、ストレートまたはニードルハンドル、へらハンドル、L字型ハンドル、先端が鋭いハンドル。

一方、ハンドルは永続的または使い捨てにすることができます。恒久的に使用するものはライターで滅菌され、再利用可能で耐久性に優れています。使い捨ては工場で無菌ですが、使い捨てで廃棄されます。

用途

調整されていないリングハンドル

微生物学研究室で最も使用されているハンドルです。微生物懸濁液（液体培地）またはコロニーの一部（固形培地）の接種材料を、場合によっては生化学的試験またはより濃縮または選択的な培地である別の培地に播種するために使用します。また、スライドに微生物の塗抹標本を作成する場合にも役立ちます。

このタイプのループでは、最初の接種材料に縞ができます。また、寒天を傷つけずに滑らかに滑るように設計されています。もちろん、これには、播種技術を処理し、適切な力と動きを加えて良好な線条を作成する訓練を受けたスタッフが必要です。

このハンドルを使用すると、さまざまなシード技術を実行できます。例、ペトリ皿の固形培地は通常、枯渇によって播種されます（いくつかの手法があります。ビデオ1を参照してください）。

この手法は、特にサンプルが微生物である場合、つまり培養物が純粋ではない場合（複数の種類の微生物を含む）、コロニーを研究および特定するために分離されたコロニーを取得することを目的としています。

代わりに、ウェッジは単純なジグザグに植えられ、細菌の塊を取得します。この場合、コロニーを分離する必要はありません。

時々それらはまた特定のサンプルを取るために使用されます。たとえば、Rojas et al。は細菌学的ループを使用して、ラットから掻き取った膣組織サンプルを収集しました。

キャリブレーションされていない、リングチップ付きの細菌ループ。出典：Pixinio.com

調整されたリング型ハンドル

このハンドルは、その名前が示すように、特定の量の微生物懸濁液を取るように調整されています。これは、接種材料が当技術分野で標準化されているものに準拠する必要がある場合に使用されます。

たとえば、尿培養を植えることは非常に一般的です。この場合、0.01 mlおよび0.001 mlの校正済みループを使用できます。

キャリブレーションされたハンドルには、サンプルが取られる角度と容器の口のサイズによって変化する誤差のマージンがあることに注意してください。

0.001 mlのループを小さな口（≤7 mm）の容器に垂直に挿入すると、必要量が50％少なくなります。

これは、容器の口の直径が小さいほど表面張力が高くなり、したがって（ガラス-液体）間の付着力が増加するために発生します。これにより、ハンドルにかかる液体の電荷が少なくなります。

一方、口の広い容器（22mm以上）で45°の角度で撮影すると、必要量より150％多く採取できます。この場合、表面張力は低くなり、ガラス/プラスチックの凝集力は減少しますが、液液凝集力は増加します。

上記のため、コロニー形成単位を定量化するための他の方法が尿培養に好ましい場合があります。

ストレートまたはニードルハンドル

スレッドハンドルとも呼ばれます。特定の生化学的試験、特にパンクチャー法による播種が必要な試験に接種するために使用されます。例：SIM、MIO、O / Fメディアなど、ブロックの形で準備された半固体メディア。

さらに、運動性を評価するMIOおよびSIMの場合、細菌が最初の接種材料の側面に向かって成長するときに正の運動性の解釈が行われるため、穿刺を針ループで行うことが不可欠です。

ループループを接種したテストは結果を偽造する可能性があります（誤検知）。このため、この種の播種では、パンクが固有であり、パンクが取り除かれると、入った方向と同じ方向に出るように注意する必要があります。

くさび形で準備されているにもかかわらず、針で播種する必要がある別のテストは、クリグラーです。このテストでは、特定の化学反応を起こすには酸素の少ない培地が必要なので、酸素が寒天の奥深くに浸透することは推奨されません。このハンドルは、継代培養の目的で特定のコロニーに触れるためにも使用されます。

へらハンドル

ほとんどの微生物は柔らかく、流しやすいコロニーを作ります。しかし、コロニーが硬く乾燥している微生物剤もあります。たとえば、一般的なマイコバクテリアや一部の菌類です。これらの場合、スパチュレートハンドルを使用すると便利です。

「L」字型ハンドル

最も頻繁に使用されるのは、菌類の培養物、特にカビの鳴き声です。

シャープな先端ハンドル

それらを継代培養できるようにするために、微生物培養に存在する非常に小さなコロニーを取得するのに役立ちます。

播種技術

ビデオ1

プラチナハンドルの滅菌

ハンドルは使用前後に滅菌する必要があります。ライターの細菌ループを消毒するには、次の手順に従います。ハンドルを炎の上部に配置し、先端から上に向けて消毒するように、できるだけ垂直な位置にします。

細いフィラメントが真っ赤になったら無菌と言えます。それを使用するには、冷却し、選択したサンプルを取得します。（ビデオ2を参照）。

細菌ループの滅菌

ビデオ2

参考文献

1. 「細菌ループ」ウィキペディア、フリー百科事典。2019年7月23日13:31 UTC。2019年8月18日22:45。ウィキペディア。
2. Herrera D、LópezP、Duque J、PérezL、Golding R、HernándezC。Soc。来る。微生物。2010; 30（1）：37-42。入手可能：ve.scielo.org
3. Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリーとスコットの微生物学的診断。12 ed エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。
4. Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W（2004）。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。
5. Rojas A、Pardo-Novoa J、Rio R、Gómez-HurtadoM、LimónD、Luna Fなど ラットの急性疼痛モデルにおけるEupatorium arsenei花からのヘキサン抽出物の鎮痛効果の測定。mex。理科。ファーム。2015; 46（1）：64-69。利用可能：scielo.org