血液培養：それの理由、根拠、手順、結果 - 生物学 - 2025

血液培養は、血液中の微生物の存在を検出しようとする細菌試験です。血液は本来無菌の液体であるため、生理的条件下に維持する必要があるため、血液中の細菌や真菌の存在は常に病的です。

細菌や真菌が血液中に見つかったが、増殖が免疫系による微生物の排除を超えない場合、それは菌血症（細菌の場合）または真菌血症（真菌の場合）と呼ばれます。しかし、微生物が無数に増加する場合、それは敗血症と呼ばれます。

血液培養ボトル（黄色：小児の好気性、緑：成人の好気性、および赤：成人の嫌気性）。出典：著者MSc Marielsa Gilが撮影した写真。

菌血症、真菌血症および敗血症は患者の生命を危険にさらすため、直ちに治療する必要があります。そのため、血液に感染の疑いがある場合、医師は血液培養検査を要求します。

この細菌学的分析により、血中に感染症があるかどうか、および関与する微生物がどれであるかを知ることができます。さらに、それが陽性である場合、どの抗生物質または抗真菌剤が治療に使用できるかを知るために感度テストが行​​われます。

一方、24時間のインキュベーションで血液培養が陰性である場合は、240時間陰性になるまで廃棄しないでください。これにより、増殖の遅い微生物がなくなります。

血液培養の信頼性を高めるには、サンプルを採取する際に極度の無菌措置を採用する必要があり、テストの信頼性と感度を高めるには、発熱のピーク時またはピーク近くに少なくとも2つのサンプルを採取する必要があります。

それは何のため？

血液は無菌の液体であり、その中に微生物が見つかると100％病理学的です。この状況は、患者の生活を損なう非常にデリケートな臨床像を表しています。

血液培養は、血流中の微生物の存在を検出する重要な細菌学的検査です。

微生物は、肺炎、腹腔内感染、腎盂腎炎、皮膚の重篤な感染症、軟部組織、関節炎などの血管外感染症である可能性があるさまざまな経路で血液に到達する可能性があります。

または、静脈内、例えば、静脈内または動脈カテーテルの汚染、心内膜炎、静脈内薬物中毒、汚染された薬物または溶液の投与などでもよい。

敗血症の原因物質を適時に検出して治療することは、患者の生存を確保するために不可欠です。

この意味で、医師は、敗血症の疑いのある兆候や症状を観察したときに、血液培養の実現を示す必要があります。 36°C）。

その他の兆候としては、悪寒、白血球数の増加（> 10,000細胞/ mm ³）、または多形核細胞の有意な減少（<1,000 PMN / mm ³）などがあります。他の警告サインの中でも、突然、多臓器の悪化または活力の喪失。

菌血症は一定、一過性、または断続的である可能性があります。循環している微生物が見つかる可能性が高い場合は、サンプルを採取する必要があるため、サンプルを採取する際に重要です。

したがって、異なる場所で少なくとも2つのサンプルを取得することをお勧めします。さらに、理想は、サンプルが熱っぽいピークで、または患者が震え、極度の低体温症、発汗または頻脈を示すときに採取されることです。

ただし、血液培養が真に有用なツールとなるためには、サンプルを細心の注意を払って採取する必要があります。サンプルを採取する時点での不正な操作または不適切な無菌状態は、テストを無効にし、誤検知を引き起こす可能性があります。

基礎

この研究では、2つまたは3つの血液サンプルを無菌で採取し、それを特別なボトルに入れます。

血液サンプルを培養するための特別なデバイスは、血液培養ボトルと呼ばれます。これらは次のように分類されます。

患者の年齢に応じて

-小児用

-大人用。

微生物の種類に応じて

-好気性微生物（好気性細菌、通性細菌および真菌）のフラスコ。

-嫌気性微生物（厳密な嫌気性菌）の血液培養ボトル。

液体培地を含むものと、固体および液体培地を同時に含むものがあります。それらはまた、活性炭粒子とともに存在します。

処理する

サンプリングに関する推奨事項

-微生物学の分野で高度に訓練され、訓練された担当者が採取するサンプル。

-無菌またはサンプル収集サイトの徹底的な洗浄は、間違いなく最も重要なステップです。

-すべてのサンプリングと同様に、医療従事者はプロセス中のバイオセーフティ対策（手袋、ガウン、ガラスなどの使用）を完全に遵守する必要があります。

-サンプル採取に必要な道具がすべて揃っていることを確認してください。

-バイアルに患者の氏名、日付、医療記録番号、サンプル収集時間、および検査室のシーケンス番号をラベル付けします。

-理想は、患者が抗菌療法を開始する前にサンプルを採取することです。進行中の治療の機能不全が疑われる場合にのみ示されます。この場合、抗生物質阻害剤（活性炭粒子）を含む血液培養ボトルを使用して、薬物交換前にサンプルを採取する必要があります。

-少なくとも2つのサンプルは、右腕と左腕などの異なる解剖学的部位で採取する必要があります。心内膜炎が疑われる場合は、3つのサンプルが推奨されます。各サンプルには2つのボトルが含まれます（1つは好気性菌用、もう1つは嫌気性菌用）。

サンプル量

サンプルの量は患者の年齢によって異なりますが、血液/培養液の希釈に関しては、1：5から1:10の比率を常に維持する必要があります。

新生児では、推奨されるサンプル量は1バイアルあたり1 mlの血液です。小児用ボトルを使用しています。

1ヶ月から1歳の乳児の場合、1瓶あたり1.5 mlの血液に増やすことができます。小児用ボトルを使用しています。

2歳以上の子供では、適切なサンプル量は1バイアルあたり2.5 mlの血液です。小児用ボトルを使用しています。

思春期から、それはボトルあたり5〜10 mlの間の血液量に増やすことができます。大人のビンを使用。

最後に、成人の段階では、必要な量はボトルあたり8-10 mlです。大人のビンを使用。

サンプリング

-血液サンプルは静脈または動脈です。ただし、動脈血は静脈サンプリングが不可能な場合にのみ採取されます。

-次の場合を除いて、中心静脈カテーテルからサンプルを採取することはお勧めしません。

1. 末梢（静脈または動脈）でサンプルを採取することは不可能です。
2. 出血の危険がある患者。
3. 中心静脈カテーテルの汚染による菌血症が疑われる場合。
4. 患者が抗菌治療を受けているかどうかに関係なく、発熱が4〜5日の発熱停止後に再び現れるとき。

サンプリング前の無菌

-サンプリングする解剖学的部位を選択します。一般的に、最高の口径の静脈が選択されます（基底静脈または頭側静脈）。

-米国アトランタの疾病管理センター（CDC）によると、オペレーターはサンプリング前に、手袋を着用するだけでなく、2％クロルヘキシジンまたは10％ポビドンヨードで手を洗う必要があります。

-使用する静脈を触診して位置を確認します。

-石鹸のクロルヘキシジンまたは防腐剤の石鹸を使用して、中心から外側に向かって動きながら、穿刺領域を回転させて清掃します。滅菌生理食塩水ですすぐ。

その後、防腐剤を塗布し、作用させます。例グルコン酸クロルヘキシジン0.5％1分間またはポビドンヨード10％2分間。後者については、まず患者がヨウ素にアレルギーがあるかどうかを尋ねます。アレルギーがある場合は、70％アルコールで代用できます。

サンプル抽出

-止血帯を配置して血流を悪化させ、静脈を発芽させます。

-再度指で穿刺部位に触れないでください。これが厳密に必要な場合は、指を穿刺領域と同じ方法で洗う必要があります。

-注射針または頭皮を静脈に挿入し、必要な量の血液を抽出します。

-それが無菌でない場合、それを削除するときに針に綿やガーゼを置かないでください。

-キャップに触れずに、ボトルからセキュリティシールを慎重に取り外します。一部の著者は、サンプルを接種する前にキャップを消毒することを推奨しています。

-バイアルに適切な量の血液を分配します。インジェクターでサンプルを採取する場合は、まず嫌気性フラスコに必要量を、次に好気性フラスコに注ぎます。頭皮（バタフライ）で撮ると逆に注がれます。

-血液培養瓶を転倒混和します。

-手袋を交換し、2番目のサンプルコレクションについて前の手順を繰り返します。

-2番目のサンプルが別のサイトから取得された場合、すぐに実行できますが、同じサイトからの場合は、1つのサンプルと別のサンプルの間で30〜90分待つ必要があります。

-サンプルはできるだけ早く実験室に持ち込む必要があります。これが不可能な場合は、室温で最大18時間放置する必要があります。

文化

いったん実験室に入ると、フラスコは各フラスコの条件下で、すなわちそれぞれ好気性および嫌気性状態で37°Cでインキュベートされます。

手動の方法では、リンギングは24時間のインキュベーションで開始し、その後1日ごとにリンギングする必要があります。リングは次のように実行されます。最初にボトルのキャップを消毒し、無菌注射器の針を挿入します。フラスコから液体を抽出し、血液寒天培地とチョコレート寒天培地に播種します。

成長がある場合は、グラムが実行され、特定の培地での継代培養、生化学的試験、および抗生物質が行われます。

自動化された方法では、バイアルが陽性であることを検出すると、Bact / Alert機器がアラームを発します。同じように、それは血の寒天とチョコレートの寒天でタップされるべきです。

地盤を確立している別の方法は、質量分析によるインキュベーションの6時間後にフラスコを分析することです。この方法により、診断の感度と速度が向上しました。

結果

血液培養ボトルが陰性である限り、予備的な中間報告を担当医師に与えることができます。レポートはそれが孵化している時間でそれが負であることを示しています。たとえば、4日目までにマイナスになると、次のように報告されます。

予備結果： 96時間のインキュベーションでの陰性培養。

注：学習は240時間続きます。

血液培養が陽性である場合、治療を行う医師に直ちに通知され、少なくともコロニーのグラムが記載されたレポートが送信されます。例：

予備結果：培養48時間の陽性培養では、グラム陰性桿菌と陰性オキシダーゼが観察されます。識別および感度テストが進行中です。

この情報は、臨床医の最終結果を待つ間、可能性のある微生物に対する経験的治療を開始するように治療する医師をガイドします。

細菌学的研究が完了すると、つまり微生物が特定され、抗生物質が利用可能になったら、最終報告をできるだけ早く送信する必要があります。

標的微生物が淋菌または髄膜炎菌である場合、これらの細菌は高濃度のポリアネトスルホン酸ナトリウム（SPS）の存在下で阻害されるため、特別な注意が必要です。

このため、この化合物は血液培養ボトルで0.025％を超えてはなりません。

一方、血液培養サンプルを最初にバキュテイナーチューブで採取した場合、これらのチューブには髄膜炎菌および淋菌に対して有毒な濃度のSPSがあるため、血液は培養液培養システムに1時間以内に移送する必要があります。

血液培養が陽性であるか汚染であるかを見分ける方法

採血した血液バイアルのうち、血液培養バイアルが1つだけ増殖した場合、血液培養は汚染されていると見なされます。また、分離された微生物が正常な皮膚微生物叢である場合は、汚染の疑いが高まります。例：コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、プロピオニバクテリウム属菌など。

しかし、免疫不全患者では、微生物を無視するべきではありませんが、この場合、微生物はいくつかのサンプルに現れるはずです。

一方、2つの異なるサンプルで分離された同じ微生物の抗生物質に対する感受性が同じであれば、感染は本当です。

汚染された血液培養は遅く成長するため、別の特徴は細菌の負荷ですが、未処理の患者の実際の感染症は、微生物が非病原性である場合、14時間のインキュベーションで一般的に陽性です。

一方、抗菌薬で治療された患者では、負荷が非常に低いため、関与する微生物の増殖に時間がかかる場合があります。

複数の微生物の出現は汚染を示唆している可能性がありますが、同じ結果が異なる場所からのいくつかのショットで繰り返される場合、それは本当です。

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