平均ケアリーブレアは、腸の病原体、微生物および嫌気性不安定を保有する生物学的試料の輸送および保存のために使用される半固体寒天です。すべての輸送手段と同様に、その機能は、培養されるまでサンプルを最適な状態に保つことです。存在する病原微生物、および付随する微生物相は、生存力を維持する必要がありますが、個体数を増やすことはありません。
Cary Blair Mediumは、Stuart Transport Mediumの配合変更の結果です。修正は1964年に行われ、pH調整システム(グリセロリン酸塩)をリン酸化無機緩衝液で置き換えることからなりました。
A.ケアリーブレア培地を含むカルチャーB.ケアリーブレア培地を含むスツールコレクター。出典:A. Video Meganhow、2011年に創傷文化を取得するyoutube.com B.ユーザー:Mattes
ある時間の後にグリセロホスフェートが一部の腐生細菌によって代謝される可能性があることを作成者が認識したため、再調整が必要でした。これらは、存在する病原菌と重複しています。
その他の変更点は、メチレンブルーの除去、およびアルカリ度(pH 8.4)へのpHの再調整でした。これらすべての変更により、輸送手段の効率が向上しました。
もともとCary Blair培地は、Shigella flexneri、Salmonella sp、Vibrio cholerae、Campylobacter spなどの腸内病原菌の維持に使用されていました。
しかしながら、要求の多い不安定な病原体の生存能力を維持する効果がその後見られました:淋菌、インフルエンザ菌、髄膜炎菌、百日咳菌、肺炎球菌およびいくつかの嫌気性菌。
基礎
ケアリーブレア培地には、塩化ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、リン酸二ナトリウム、塩化カルシウム、寒天が含まれています。
塩化ナトリウムは培地の浸透圧バランスを維持し、リン酸二ナトリウムと塩化カルシウムはpHのバランスをとります。部分的には、チオグリコール酸ナトリウムは低い酸化還元電位を維持しますが、寒天のごく一部は半固体の一貫性を提供します。
Cary Blair培地には栄養物質が含まれていません。輸送培地の機能は、水分と微生物負荷の観点からサンプルを変化させずにサンプルを維持することです。つまり、存在する微生物の生存率と量を維持しながら、サンプルの脱水を回避します。
最後に、わずかにアルカリ性のpHは、酸性による微生物の死を防ぎます。特に、Vibriosは酸に非常に敏感です。
準備
Cary Blair培地は、すぐに使用できる特別なデバイスとして市販されています。輸送システムは、プラスチック製のピールパックバッグで覆われています。内部には、サンプルを収集するための綿棒と、Cary Blairの半固体培地のコンテナチューブが含まれています。
また、市場には研究室での準備のために脱水培地を供給する商業用の家があります。
これを行うには、13.2 gの脱水培地を計量し、1リットルの蒸留水に溶解します。完全に溶解するまで調製物を加熱して振る。ネジ付き試験管(ベークライト)で培地を分配します。
チューブを15分間蒸します。冷まし、使用するまで室温に保ちます。
接種していないCary Blair培地は、室温で最長18か月間最適に保存できます。
培地のpHは8.4±0.2に調整する必要があります。調製した培地の色はベージュ色で、ある程度の乳白色をしています。
使用する
サンプルのタイプ
Cary Blair Mediumは、便のサンプル、直腸スワブ、および膣スワブをすぐに処理できない場合に使用します。
輸送手段がない場合、サンプルは-70°Cで保存できます。
サンプリング
綿棒にサンプルを含浸させ、底に到達せずにCary Blair培地に導入します。
サンプルの識別
ケアリーブレア培地には、患者の氏名、サンプルの識別番号、サンプルコレクションのソース、担当医、コレクションの日時などの基本データが配置されたラベルが必要です。サンプル、推定診断、抗生物質治療。
転送
糞便サンプルの場合、しっかりとカバーされ、室温で輸送されます。一方、嫌気性微生物を探す膣サンプルの場合は、サンプルを4°Cで輸送することをお勧めします。
すべての場合において、推奨される転送時間は4〜6時間で、最大24時間です。
便試料中にカンピロバクタージェジュニの存在が疑われ、これらが24時間以内に処理できない場合は、4°CのCary Blair培地での保管をお勧めします。
ケアリーブレアの輸送手段で実施された調査
いくつかの研究では、Cary Blair培地は、サンプル採取後最大49日間、シゲラ属およびサルモネラ属の腸管病原性微生物の生存能力を維持できることが示されています。
別の重要な腸内病原菌であるコレラ菌は22日間生存できますが、エルシニアペスト(腺ペストの原因物質)は75日後に回復できます。
ただし、これらの微生物の回収に関して耐久性が実証されているにもかかわらず、採取したサンプルは、できるだけ早くCary Blair培地で実験室に輸送することをお勧めします。
同様に、サンプルが実験室に到着したら、それぞれの培地に遅滞なく播種する必要があります。
一方、通性微生物の輸送に役立つだけでなく、嫌気性病原体を含むサンプルには、Cary Blair培地も推奨されます。
この意味で、DeMarco et al。は、2017年に「3つの市販の輸送システムにおける膣微生物の生存」というタイトルの調査を実施しました。
彼らは、Cary Blair輸送培地が膣の嫌気性微生物の保存と回復に最適な輸送培地であることを示しました。同様に、転写温度が4°Cのときに最高の回収率が達成されることを示しました。
したがって、膣スワブ(嫌気性微生物)の輸送温度は4°Cである必要があると結論付けられます。通性微生物を探す糞便サンプルの場合、理想的な温度は室温です。
QA
ケアリーブレア輸送培地、赤痢菌ATCC 11060、サルモネラコレラエスATCC 14028、ビブリオコレラ菌、カンピロバクター種として知られている菌株の品質管理を評価します。
培地に選択した株を接種し、室温で24時間保持します。その後、それらは対応する培養培地に播種されます。すべての場合において、問題の微生物の満足のいく回収が期待されます。
参考文献
- DeMarco AL、Rabe LK、オースティンMNなど。3つの市販の輸送システムにおける膣微生物の生存率。嫌気性菌。2017; 45:44–49。
- Wasfy M、Oyofo B、Elgindy A、ChurillaA。糞便サンプルの保存用の保存培地の比較。J Clin Microbiol。1995。33(8):2176–2178。
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- Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W(2004)。微生物学的診断。第5版 エディトリアルPanamericana SAアルゼンチン。
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- Conda Pronadisa Laboratories。ハーフケアリーブレア。利用可能:condalab.com
- メトリックス研究所。ケアリーブレア。入手可能:metrixlab.mx