単一の染色は、それが簡単で呼ばれて、単一の色素が使用される染色手順の迅速かつ簡単です。これは主に、サンプルに存在する細胞の形態と組織を決定するために使用されます。
細胞は自然に無色なので、顕微鏡下で見たときに何らかの方法でそれらを見えるようにする必要があります。
単純なメチレンブルー染色により染色されたヒトの頬細胞。
簡単な染色で使用される色素は、細胞壁と細胞質に自発的に結合できるように、正の電荷(カチオン)で塩基性でなければならないことに注意することが重要です。
これらの細胞構造は負に帯電しています。これが、正に帯電した色素が細胞に引き付けられ、自然にそれらに結合する理由です。したがって、サンプルに存在するすべての細胞はすぐに染色されます。
単純染色で使用される染料
微生物学研究室で使用できるいくつかの基本的な染色があります。最も使用されるのは:
- メチレンブルー。
- クリスタルバイオレット。
-マラカイトグリーン。
-基本的なフクシン。
これらの染料はすべて、正に帯電した(カチオン)カラーイオン(発色団)を持っているため、細菌でうまく機能します。
これらの汚れのほとんどの染色時間は比較的短いです。それらは、染料の親和性に応じて、一般的に30秒から2分の範囲です。
簡単な染色でサンプルを染色する前に、サンプルを伸ばしてスライドガラス(スライド)に固定する必要があることに注意してください。拡張され固定されたサンプルはスミアと呼ばれます。
簡単な染色の6つのステップ
ステップ1
スライドを染色ラックに置き、目的の染色を適用します。対応する時間を行動させてください。
通常、単純な染色には、使用する染色に応じて、数秒から数分かかります。
観察
このステップでは、使用する色素の推奨時間を超えないようにすることが重要です。シート上に結晶が形成され、細胞の形態を歪める「アーティファクト」と呼ばれるものが生成される可能性があるためです。
ステップ2
流出液がきれいになるまで、スライドの塗抹標本をボトルからの蒸留水またはゆっくりと流れる水道水で十分に洗い流します。これには通常5〜10秒かかります。
観察
同じ力がサンプルに損傷を与えないように、スミアに直接水流を当てないでください。
蒸留水がない場合は、染色結果に影響を与えないので問題なく水道水を使用できます。
ステップ3
スライドを吸い取り紙タオルで一方向にこすらずに拭き取ります。スライドの下側がきれいであることを確認します。
ステップ4
顕微鏡下で染色された塗抹標本を観察します。最も遠くの目的から始めて、より詳細に観察したい領域を適切に見つけます。サンプルに近づくように目的を変更します。
観察
より高い倍率(通常100X)の対物レンズを使用する場合は、液浸油を使用する必要があります。これにより、光がよりよく浸透し、画像がより鮮明に見えます。カバーガラスを使用する必要はありません。
手順5
最後に、すべてのサンプルを適切に「バイオハザード」と表示された適切な容器に廃棄します。
参考文献
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