サフラニン：特性、使用、技術、毒性 - 化学 - 2025

サフラニンは 2個のベンゼノイド環を有するその化学構造のために、図2キノイド環の名前付きmeriquinoide色素、である後者は赤色を提供するものです。

学名は3,7-diamino-2,8-dimethyl-5-phenyl-phenaziniumchloro dimethyl safraninであり、化学式はC ₂₀ H ₁₉ N ₄であるため、短い形式ではジメチルサフラニンまたはベーシックレッド2とも呼ばれます。Cl。

サフラニンの化学構造はベンゼノイドとキノイドの環を示しています/サフラニンの水溶液。出典：MScが編集したNEUROtiker マリエルサ・ギル/ LHcheM

トリメチルサフラニンと呼ばれるバリアントがありますが、2つの物質の間に大きな違いはありません。

サフラニンは単色染料であり、化学式の特性に応じて、正に帯電した物質です。したがって、負に帯電した構造に対して親和性があります。これらの構造は赤く染色されます。

この特性は、真核生物と原核生物の両方のさまざまな細胞構造を染色するために、多くの組織学的手法に適用できます。

サフラニンは、細菌学での日常的な使用のための重要かつよく知られた技術で造影剤として使用されます。これらのテクニックは次のとおりです。とりわけ、グラムハッカー染色、胞子のSchaeffer Fulton染色、または細菌カプセルの染色。

特徴

サフラン（クロッカスサティバスの花の柱頭から得られるスパイス）の色は、この染料に名前を付けるためのインスピレーションでした。サフランという用語からサフラニンの名前が生まれます。これは、サフランの色とこの染料が提供する色の間に非常に類似性があるためです。

サフラニンは結晶または粉末として入手可能であり、どちらの提示も水に溶ける。サフラニン染料は無臭です。汚れの構造は赤。サフラニン染料を引き付ける構造は、サフラノフィルと呼ばれます。

構造的にサフラニンは複雑で、両端に2つのベンゼン環があり、中央にN ⁺カチオンが見られる2つのキノイド環があります。構造の中心は、配色を担当するシステムです。この特性により、この着色剤はカテゴリーIIに分類されます。

使用する

サフラニンは、さまざまな構造を染色するために使用されます。特に、消化管に存在するクルチスキー細胞、および腸クロム親和性細胞とも呼ばれます。

リケッチア科に属する微生物を染色することができます。同様に、これは、ブルセラ属の細菌を染色するために改変されたコスター法などの様々な技術で使用されます。

一方、サフラニンは、シェファーフルトンの胞子染色技術とグラムハッカー染色で使用されます。どちらの手法でも、サフラニンは造影剤として機能します。

最初に、胞子はマラカイトグリーンの色をとり、残りの構造はサフラニンによって赤になります。第二段階では、グラム陰性菌は変色工程で紫色の結晶の色を失うため、サフラニンはグラム陰性菌を赤く染めるものです。

さらに、細菌学ではサフラニンを使用して、サフラニン1を5000に希釈したブルセラ寒天培地を調製します。この培地は、ブルセラsuis種を他の種と区別するのに役立ちます。Brucella melitensisとBrucella abortusはこの培地で成長しますが、B。suisは抑制されます。

サトウキビの茎サンプルを染色するために、農業産業分野では、サフラニンが2.25％で使用され、1：10に希釈されています。

この植物は、一般的に細菌Leifsonia xyli subspの影響を受けます。植物の木部を損傷する木部。染色された茎は木部血管の機能を決定するために評価されます。

細菌学の分野の技術

R染色用のカスタニェダ染色

血液または組織塗抹標本を緩衝液（リン酸緩衝液pH 7.6）に入れます。自然乾燥させ、メチレンブルーで3分間覆い、サフラニンで対比染色します。リケッチアは青の色で、赤の背景とは対照的です。

変更されたコスター染色

スミアを作成し、ライターで固定して固定します。続いて、2部の飽和サフラニンと3部の1 mol / L KOH溶液の混合物で1分間覆います。洗浄は蒸留水で行い、1％カルボリックメチレンブルーで対比染色します。

サンプルにブルセラ属の細菌が含まれている場合、青色の背景にオレンジ色で表示されます。

バクテリアカプセル染色

細菌懸濁液の混合物は、インドのインクで作られ、サフラニンが追加されます。顕微鏡下では、赤のハローが黒の背景で各細菌カプセルの周囲に表示されます。

胞子染色

バクテリア懸濁液でスプレッドを作ります。それからそれは熱に固定されます。5％マラカイトグリーンで覆われており、蒸気が出るまで頻繁に炎上します。このプロセスは6〜10分間繰り返されます。最後に、水で洗浄し、0.5％サフラニンで30秒間対比染色します。桿菌は赤く染まり、胞子は緑に染まる。

グラムハッカー染色

細菌懸濁液で塗抹標本を作成し、熱で固定します。スライドをクリスタルバイオレットで1分間カバーします。次にルゴールを媒染剤として1分間置く。続いて、それはアセトンアルコールで漂白され、最後にサフラニンで30秒間対比染色されます。

グラム陽性菌は青みがかった紫とグラム陰性菌は赤く染まります。

一部の研究室では、Gram-Hucker手法を使用して修正されたGram-Kopeloff手法を採用するのをやめています。後者では、サフラニンは基本的なフクシンに置き換えられます。これは、サフラニンがレジオネラ、カンピロバクター、ブルセラ属の種を弱く染色するためです。

組織学の分野における技術

クルチスキー細胞染色（エンテロクロマフィン）

胃腸管の組織切片は塩化銀で染色されています。その後、チオ硫酸ナトリウムで脱色し、最後にサフラニンで対比染色します。

クルチスキー細胞は黒褐色の顆粒の存在によって区別されます。

変形性関節症染色

サフラニンは正の電荷を持っているため、グリコサミノグリカンのカルボキシル基と硫酸基に非常によく結合します。これらは関節軟骨を構成するプロテオグリカンの一部です。この意味で、サフラニンOで染色すると、軟骨の欠損の有無を判別することができます。

軟骨組織の喪失は、マンキンスケールまたは変形性関節症スケールとも呼ばれます。

テクニックを以下に説明します。組織切片をワイガートの鉄ヘマトキシリン溶液が入ったトレイに浸し、酸性アルコールに通して水で洗浄します。

スライドをファストグリーンに浸して着色プロセスを続行し、スライドを酢酸で洗浄して、サフラニンOに浸します。プロセスを完了するには、昇順でさまざまな濃度のアルコールを使用して脱水します。最後のステップでは、サンプルを明確にするためにキシレンまたはキシレンが必要です。

スライドは、カナダのバルサムまたは同様の顕微鏡で観察するために調整されています。

この手法では、核は黒く染色され、骨は緑色に染色され、軟骨はプロテオグリカンが赤色に染色されます。

大型藻類の同定のための染色

2003年にペレスらは、大型藻類を染色するためのシンプルで安価な手法を提案しました。サンプルはパラフィン組織切片で準備されます。切片は1％グリセリンで固定され、完全に乾燥します。次に、パラフィンを除去するためにキシロールに入れます。

異なる濃度のエタノール（降順）を含む一連のトレイに2分間ずつ通して、セクションを再水和します。

続いて、1％サフラニンと1％トルイジンブルーの3：1混合物で5分間染色します。両方とも50％エタノールで調製します。媒染剤として機能するピクリン酸の3滴が混合物に追加されます。

その後、再びアルコールトレイを通過することにより脱水されますが、今回は昇順です。最後に、それをキシロールですすぎ、サンプルを観察するためにカナダバルサムで調製します。

毒性

幸いなことに、サフラニンはそれを扱う人々にとって危険を表さない染料です。無害な着色剤であり、発がん性がなく、引火性もありません。

皮膚や粘膜に直接接触すると、大きな合併症を起こすことなく、その領域にわずかな発赤を引き起こす可能性があります。このため、患部を大量の水で洗うことをお勧めします。

参考文献

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