暗視野顕微鏡：特性、部品、機能 - 生物学 - 2025

ダークフィールド顕微鏡は、特定の実験室で使用される特殊な光学機器です。これは、明視野顕微鏡に変更を加えた結果です。暗視野顕微鏡法は、透過照明または落射照明によって実現できます。

1つ目は、光線がコンデンサーに到達する前に介入するデバイスを使用して、コンデンサーに直接到達する光線をブロックすることです。

暗視野顕微鏡/暗視野顕微鏡で見られるトレポネーム。出典：Dietzel65 / Judith Miklossy、Sandor Kasas、Anne D Zurn、Sherman McCall、Sheng Yu、Patrick L McGeer

透過光による暗視野は、構造を強調することを可能にし、非常に薄い粒子を観察することができます。暗い背景に構造物が屈折または明るさで表示されます。

落射照明効果は、入射光または斜め光で達成されます。この場合、顕微鏡には特別な三日月形のフィルターが装備されている必要があります。

入射照明では、観察された構造は、高いレリーフで視覚効果を示すことを特徴とします。このプロパティにより、浮遊粒子のエッジを強調表示できます。

明視野顕微鏡法とは異なり、暗視野顕微鏡法は、浮遊粒子を含むフレスコの可視化に特に役立ちます。染色の種類はありません。

しかしながら、それは、乾燥調製物または染色調製物に使用できないことを含むいくつかの欠点を有する。解像度が良くありません。さらに、良好な画像を確保するために、対物レンズの開口数はコンデンサーの開口数を超えることはできません。

特徴

暗視野顕微鏡の構成は、両方の顕微鏡の基本が反対であるため、明視野に関して重要な変更を提示します。

明るいフィールドでは光線はサンプルを直接通過するように集中しますが、暗いフィールドではビームは散乱され、斜めのビームのみがサンプルに到達します。次に、これらは同じサンプルによって分散され、画像が対物レンズに向かって送信されます。

サンプルなしでスライドの焦点を合わせると、サンプルがないと対物レンズに向けて光を散乱させるものがないため、くまが観察されます。

視野内で目的の効果を得るには、特定のコンデンサーと、光線の制御に役立つ絞りの使用が必要です。

暗い視野の視野では、懸濁液中の要素または粒子は明るく屈折しているように見えますが、残りの視野は暗いため、完全なコントラストが得られます。

斜め光または入射光を使用すると、観察された構造で高いレリーフのエッジ効果が得られます。

暗視野顕微鏡の部品

出典：amazon.com

-メカニックシステム

チューブ

これは、対物レンズによって反射および拡大された画像が、接眼レンズに到達するまで移動する装置です。

かき混ぜる

これは、さまざまな目的が存在するサポートです。ターゲットは固定されていないため、削除できます。リボルバーは、オペレーターが必要なときにターゲットを変更できるように回転できます。

マクロネジ

このネジを使用して標本に焦点を合わせ、前方または後方に動かして標本をターゲットに近づけたり遠ざけたりします。この動きはグロテスクです。

マイクロメーターねじ

マイクロメーターのねじを前後に動かして、試料をターゲットに近づけたり遠ざけたりします。マイクロメトリックスクリューは、非常に細かい動きやデリケートな動きに使用され、ほとんど知覚されません。それは究極の焦点を達成するものです。

プラテン

標本がスライド上に置かれる場所です。中央に開口部があり、光線が通過します。マクロとマイクロメーターのネジを動かすと、ネジの動きに応じてステージが上下します。

車

キャリッジにより、サンプル全体を対物レンズで移動できます。許可される移動は、前後およびその逆、および左から右、およびその逆です。

保持鉗子

これらはステージ上にあり、金属製であり、観察中にスライドが回転するのを防ぐためにスライドを保持するためのものです。観察中は、サンプルを固定したままにすることが重要です。ファスナーは、スライドを受け入れるのにぴったりのサイズです。

腕またはハンドル

アームがチューブとベースを結合します。顕微鏡を片側から反対側に移動するときに、顕微鏡を保持する必要がある場所です。片手で腕をつかみ、もう一方の手でベースを持ちます。

ベースまたは足

その名前が示すように、それは顕微鏡のベースまたはサポートです。ベースのおかげで、顕微鏡は平らな面に固定して安定させることができます。

-光学システム

ゴール

それらは円筒形です。彼らはサンプルから来るイメージを拡大する底にレンズを持っています。目的はさまざまな倍率にすることができます。例：4.5X（拡大鏡）、10X、40Xおよび100X（液浸対物レンズ）。

液浸対物レンズは、対物レンズとサンプルの間に数滴のオイルを配置する必要があるため、そのように呼ばれています。その他はドライターゲットと呼ばれます。

目標は、それらが持つ特性とともに印刷されます。

例：メーカーのブランド、像面湾曲補正、収差補正、倍率、開口数、特別な光学特性、液浸媒体、チューブ長、焦点距離、カバースリップの厚さ、コードリング色。

レンズの下部に前部レンズがあり、上部に後部レンズがあります。

接眼レンズ

古い顕微鏡は単眼であり、つまり接眼レンズが1つだけあり、現代の顕微鏡は双眼鏡であり、つまり接眼レンズが2つあります。

接眼レンズは円筒形で中空の形状です。これらは内部に収束レンズを持ち、レンズによって作成された虚像を拡大します。

接眼レンズがチューブに加わります。後者は、対物レンズによって送信された画像が接眼レンズに到達することを可能にします。

接眼レンズの上部には接眼レンズと呼ばれるレンズがあり、下部にはコレクターと呼ばれるレンズが収められています。

また、ダイヤフラムがあり、場所に応じて名前が付けられます。両方のレンズの間にあるものはホイヘンス接眼レンズと呼ばれ、2つのレンズの後にある場合はラムズデン接眼レンズと呼ばれます。他にもたくさんありますが。

接眼レンズの倍率は、顕微鏡によって5X、10X、15X、または20Xの範囲です。

オペレーターがサンプルを見ることができるのは、接眼レンズを通してです。一部のモデルでは、左の接眼レンズに可動式で画像調整が可能なリングが付いています。この調整可能なリングは、視度リングと呼ばれます。

-照明装置

ランプ

これは照明の光源であり、顕微鏡の下部にあります。光はハロゲンで、下から上に放射されます。一般的に、顕微鏡のランプは12 Vです。

ダイヤフラム

暗視野顕微鏡の絞りにはアイリスがありません。この場合、ランプからの光線がサンプルに直接到達するのを防ぎ、斜めのビームのみが試料に接触します。サンプルに存在する構造によって分散されるビームは、ターゲットを通過するビームです。

これは、構造が暗いフィールドで明るく明るく見える理由を説明しています。

コンデンサー

暗視野顕微鏡のコンデンサーは明視野のものとは異なります。

屈折コンデンサと反射コンデンサの2種類があります。後者は、放物面とカーディオイドの2つのカテゴリに分けられます。

屈折コンデンサ

このタイプのコンデンサーは、光線を屈折させるために挿入されたディスクを備えており、前面レンズの上または背面に配置できます。

このタイプのコンデンサーは、コンデンサーのフロントレンズの前に、レンズよりも小さい黒いボール紙で作られたディスク（ダイヤフラム）を配置するだけで十分なので、非常に簡単にこのタイプのコンデンサーを実現できます。

明視野光学顕微鏡は、このチップを使用して暗視野顕微鏡に変換できます。

反射コンデンサ

実体顕微鏡で使われているものです。放物面とカーディオイドの2つのタイプがあります。

• 放物面：それらは放物線に類似しているため、放物面と呼ばれる種類の曲率を持っています。このタイプの凝縮器は、トレポネームを観察できるため、梅毒の研究で広く使用されています。
• カーディオイド：コンデンサーの曲率は心臓に似ているため、「カーディオイド」という名前で、コンデンサーには同じ名前が付いています。調整可能なダイアフラムを備えています。

特徴

-臨床サンプル中のトレポネーマパリダムの存在を調査するために使用されます。

-ボレリアとレプトスピラを観察するのにも役立ちます。

-特定の構造を詳しく説明する必要がない限り、細胞や微生物の生体内挙動を観察するのに理想的です。

-カプセルや微生物の壁を強調するのに理想的です。

利点

-屈折コンデンサーを備えた暗視野顕微鏡は安価です。

-その使用は、40倍の倍率で非常に便利です。

-それらは、それらが見つかる媒体に類似した屈折率を持つサンプルを観察するのに理想的です。たとえば、培養中の細胞、酵母、スピロヘータなどの移動性細菌（ボレリア、レプトスピラ、トレポネーマ）。

・細胞を生体内で観察できるため、行動の評価が可能。例えば、ブラウン運動、べん毛による運動、仮足の放出による運動、有糸分裂のプロセス、幼虫の孵化、酵母の出芽、食作用など。

-カプセルや細胞壁などの構造のエッジを強調表示できます。

・離解粒子の分析が可能です。

・着色剤の使用は不要です。

短所

-プレパラートをマウントするときは、それらが厚すぎるとうまく観察されないため、特別な注意が必要です。

-画像の解像度が低い。

-屈折コンデンサーを使用する暗視野顕微鏡の明度は非常に低いです。

-液浸対物レンズ（100X）で画質を向上させるには、対物レンズの開口数を減らし、照明コーンの開口数を増やす必要があります。このため、対物レンズの開口数を調整できる追加のダイヤフラムを組み込むことが不可欠です。

-乾燥した製剤や着色された製剤は、生体染料でない限り視覚化できません。

-特定の構造、特に内部の構造を視覚化することはできません。

-暗視野顕微鏡はより高価です。

参考文献

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